Coombs test natijalari. Kumbs reaktsiyasi bilvosita (antiglobulin testi, to'liq bo'lmagan anti-eritrosit antikorlarini aniqlash), qon. Coombs testida IgG antikorlarini aniqlash

Eritrositlar yuzasida joylashgan katta miqdorda antijenler. Ushbu antijenlarning turiga qarab, qon guruhlari ajralib turadi, eng ko'p o'rganilgan guruhlar ABO, Rh, Kell, Duffy va boshqalar.

Sizning hududingizdagi o'rtacha narx: 2645 2645 ... dan 2645 gacha

Sizning hududingizda 1 ta laboratoriya ushbu tahlilni amalga oshiradi

O'quv tavsifi

Tadqiqotga tayyorgarlik: Qon venadan olinadi, so'ngra zardob (fibrinogensiz qon plazmasi) tabiiy koagulyatsiya yoki fibrinogenni cho'ktirish orqali olinadi. O'rganilayotgan material: Qon olish

Eritrositlar yuzasida ko'p miqdorda antijenler mavjud. Ushbu antijenlarning turiga qarab, qon guruhlari ajralib turadi, eng ko'p o'rganilgan guruhlar ABO, Rh, Kell, Duffy va boshqa ko'plab tizimlardir. Odatda qonda boshqa guruh antigenlariga antitelalar mavjud, ammo qon quyish, homiladorlik, otoimmün kasalliklar va boshqalarda ularning antigenlariga antitelalar topiladi.Qon qizil qon tanachalariga to'liq bo'lmagan antitelalar.

Usul

Bilvosita Kumbs reaktsiyasi antiglobulin zardobi qo'shilganda paydo bo'ladigan yuzasida to'liq bo'lmagan antikorlarga ega bo'lgan eritrotsitlarning aglutinatsiyasini (to'planishini) aniqlashga asoslangan.

Birinchi bosqichda donor eritrotsitlari (O(I) guruhi, Rh+) ​​va sinov zardobi bitta probirkaga qo'shiladi. Agar test zardobida eritrotsitlarga to'liq bo'lmagan antikorlar mavjud bo'lsa, u holda ular donor eritrotsitlar yuzasiga mahkamlanadi.

Ikkinchi bosqichda stakanga antikorlar (agar mavjud bo'lsa) va inson immunoglobulinlariga antikorlari bo'lgan standart antiglobulin sarumli donor eritrotsitlari qo'llaniladi. Agar birinchi bosqichda eritrotsitlarga antitelalar eritrotsitlar yuzasida fiksatsiyalangan bo'lsa, u holda standart zardob qo'shilganda, antitelolarning o'zaro ta'siri tufayli eritrotsitlar bir-biriga yopishadi.

Malumot qiymatlari - norma
(Bilvosita Kumbs reaktsiyasi (antiglobulin testi, to'liq bo'lmagan eritrotsitlarga qarshi antikorlarni aniqlash), qon)

Ko'rsatkichlarning mos yozuvlar qiymatlari haqidagi ma'lumotlar, shuningdek, tahlilga kiritilgan ko'rsatkichlarning tarkibi laboratoriyaga qarab biroz farq qilishi mumkin!

Norm:

Odatda, o'z eritrotsitlariga antikorlar bo'lmasligi kerak, Kumbs reaktsiyasini o'rnatishda eritrotsitlar agregatsiyasi sodir bo'lmaydi.

Ko'rsatkichlar

Tanadagi otoimmün reaktsiyalar, ona va homila o'rtasidagi Rh-mojaroda gumoral o'ziga xos immunitetni o'rganish, donor va qabul qiluvchi qonning mosligini aniqlash.

Ko'tarilgan qiymatlar (ijobiy natija)

Eritrositlarga antikorlar quyidagi hollarda topiladi:

1. Autoimmun gemolitik anemiya

2. Yangi tug'ilgan chaqaloqning gemolitik kasalligi

3. Tizimli kasalliklar biriktiruvchi to'qima

4. Surunkali faol gepatit va boshqalar.

- qondagi to'liq bo'lmagan eritrotsitlarga qarshi antikorlarning tarkibini aniqlashga yordam beradigan tadqiqot. Bunday antiglobulin testi homilador ayollarda antikorlarni aniqlash imkonini beradi.

Bundan tashqari, u imkon beradi dastlabki bosqichlar rezus konfliktli yangi tug'ilgan chaqaloqlarda gemolitik anemiya tashxisini qo'yish. Bu normal qon hosil bo'lishi uchun zarur bo'lgan qizil qon hujayralarining yo'q qilinishini oldini olishga yordam beradi. Ushbu test 1945 yilda Robert Kumbs tomonidan yaratilgan, shuning uchun u o'z nomini oldi.

Coombs testi ko'p qirrali tadqiqot bo'lib, kattalar va bolalarda gematopoetik kasalliklarni o'z vaqtida tashxislash imkonini beradi.

Bunday testlarning quyidagi turlari mavjud:

1. To'g'ridan-to'g'ri Coombs testi- qizil qon hujayralari yuzasida joylashgan antikorlarni aniqlash imkonini beradi. Odatda, bunday tadqiqot shubhali gemoliz, otoimmun gemolitik anemiya va boshqa otoimmün kasalliklar uchun buyuriladi. Bundan tashqari, u keyin amalga oshiriladi dori terapiyasi xinin, penitsillin yoki metildopaga asoslangan preparatlar yoki qon quyishdan keyin. Aniqroq natijalarga erishish uchun tadqiqotdan oldin kamida 1 hafta oldin dori-darmonlarni qabul qilishni butunlay to'xtatish kerak.
2. Bilvosita Coombs testi- plazmadagi eritrotsitlarga qarshi antikorlarni aniqlay oladigan test. Odatda homiladorlik paytida va qon quyishdan oldin amalga oshiriladi. Eritrositlarga qarshi antikorlar inson qonida immunitet tizimining reaktiv ishi paytida yoki ba'zilarga reaktsiya sifatida paydo bo'ladi. dorilar. Aniqroq o'rganish uchun bir vaqtning o'zida 2 soatlik interval bilan bir nechta namunalar olinadi.

Amalga oshirish uchun ko'rsatmalar

Coombs testi faqat jiddiy ko'rsatkichlar mavjud bo'lganda amalga oshiriladi. Bu qimmat va uzoq davom etadigan tadqiqot bo'lib, o'ziga xos sinovdir.

Odatda, quyidagi holatlar uni amalga oshirish uchun ko'rsatkichlar hisoblanadi:

1. Qon quyish paytida. Sinov qabul qiluvchining qoni inson tanasida ildiz otishi yoki donorlik qilish mumkinligini aniqlash imkonini beradi. Bunday holda, donorning ham, qabul qiluvchining ham materialini tekshirish kerak. Antikorlarning tabiatini aniqlash juda muhim, chunki ularning rezus mojarosi fonida tanadagi nomuvofiqligi bo'lsa, u yo'q qilinadi. immunitet tizimi. Bu jiddiy kasalliklarning rivojlanishiga, kamdan-kam hollarda esa o'limga olib keladi.
2. Old jarrohlik aralashuvlar qon ketish xavfi mavjud bo'lganda. Bu shifokor darhol tanani tiklash uchun mos qonni kiritishi uchun amalga oshiriladi.
3. Rh sezgirligini aniqlash uchun. Rhesus homiladorlik davrida har bir ayolning tanasida paydo bo'ladigan o'ziga xos antijendir. Agar onada ijobiy Rh bo'lsa va otasi salbiy bo'lsa yoki aksincha, bolaga qaramlik yo'q, u har kimni meros qilib olishi mumkin. Agar bola qarama-qarshi onaning Rh ni qabul qilsa, sezuvchanlik xavfi yuqori. Bu hodisa ona va bolaning qonini aralashtirish bilan tavsiflanadi. Bu homiladorlik paytida ham, tug'ilish paytida ham sodir bo'lishi mumkin.

Agar homilador ayolning tanasida Rh-mojaro yuzaga kelsa, onaning immuniteti uning homilasini qabul qila boshlaydi. begona jism. Shu sababli, unga hujum qilishni boshlash xavfi yuqori.

Bunday harakatlar natijasida chaqaloq jiddiy patologiyalarni rivojlanishi mumkin. Ko'pincha eritroblastoz paydo bo'ladi - bu bolaning tanasi etarli miqdordagi qizil qon tanachalarini ishlab chiqara olmaydigan hodisa.

Bundan tashqari, Rh-mojarosi tufayli, bachadonda yoki tug'ilgandan so'ng darhol xomilalik o'lim paydo bo'lishi mumkin. Da to'g'ri yondashuv bunday jiddiy oqibatlarni davolashdan osongina qochish mumkin.

Normadan chetga chiqish

Coombs reaktsiyasi uchun ijobiy natija bilan shifokor qon zardobida qizil qon tanachalariga antikorlar mavjudligi haqida xulosa qiladi. Bu donorning qoni bemorning qoni bilan mos kelmasligi mumkinligini ko'rsatadi.

Rh-salbiy qoni bo'lgan homilador ayolning tanasida ijobiy natija aniqlansa, u holda uning tanasida homilaning qoniga antikorlar mavjud.

Bu Rh-mojarosini ko'rsatadi, bu shifokor tomonidan homiladorlikni boshqarishga o'ta ehtiyotkorlik bilan yondashishni, shuningdek, ayolning barcha ko'rsatmalari va tavsiyalarini bajarishni talab qiladi.

Agar chaqaloqning qonida antikorlar mavjud bo'lsa, yangi tug'ilgan chaqaloqning gemolitik kasalligi tashxis qilinadi. Bunday holda, homilador onaning qonida antikorlarning zitherining ko'payishi yoki yo'qligini aniqlash uchun ikkinchi tadqiqot o'tkaziladi.

Coombs testidan mumkin bo'lgan asoratlar

Coombs testi dastlabki bosqichlarda bir qator otoimmün kasalliklarni tashxislash imkonini beruvchi juda xavfsiz tadqiqotdir. Odatda, kamdan-kam hollarda asoratlarni keltirib chiqaradi salbiy oqibatlar qon namunalarini olish bilan bog'liq.

Ular quyidagilardan iborat:

• Teri ostidagi qon ketishidan qon ketishi
• Bosh aylanishi va hushidan ketish
• Yuqumli infektsiya

7 295

Kumbs reaktsiyasi

Kumbs reaktsiyasi- to'liq bo'lmagan eritrotsitlarga qarshi antikorlarni aniqlash uchun antiglobulin testi. Coombs testi homilador ayollarda Rh omiliga antikorlarni aniqlash va qizil qon hujayralarining yo'q qilinishiga olib keladigan Rh mos kelmasligi bilan yangi tug'ilgan chaqaloqlarda gemolitik anemiyani aniqlash uchun ishlatiladi. Ushbu usul 1945 yilda ingliz shifokori Robert Kumbs tomonidan taklif qilingan, shu munosabat bilan u keyinchalik "Kumbs reaktsiyasi" nomini oldi.

To'g'ridan-to'g'ri Kumbs reaktsiyasi

Eritrositlar yuzasida joylashgan antikorlar ham statik holatda, ham qon plazmasida erkin holatda bo'lishi mumkin. Antikorlarning holatiga qarab, to'g'ridan-to'g'ri yoki bilvosita Kumbs reaktsiyasi amalga oshiriladi. Agar antikorlar qizil qon hujayralari yuzasida o'rnatilganligiga ishonish uchun asos bo'lsa, to'g'ridan-to'g'ri Coombs testi o'tkaziladi. Bunday holda, test bir bosqichda amalga oshiriladi - antiglobulin sarum qo'shiladi. Agar eritrotsitlar yuzasida to'liq bo'lmagan antikorlar mavjud bo'lsa, eritrotsitlarning aglutinatsiyasi sodir bo'ladi.

Bilvosita reaktsiya

Bilvosita Kumbs reaksiyasi 2 bosqichda boradi. Birinchidan, qizil qon hujayralarining sezgirligini sun'iy ravishda amalga oshirish kerak. Buning uchun eritrotsitlar va o'rganilayotgan qon zardobi inkubatsiya qilinadi, bu eritrotsitlar yuzasida antikorlarning fiksatsiyasiga olib keladi. Shundan so'ng, Kumbs testining ikkinchi bosqichi - antiglobulin sarum qo'shilishi amalga oshiriladi.

Eslatmalar

Wikimedia fondi. 2010 yil.

Boshqa lug'atlarda "Kumbs reaktsiyasi" nima ekanligini ko'ring:

COOMBS REAKSIYASI- (Coombs testi) qon zardobida globulinlarning cho'kishiga olib keladigan eritrotsitlar yuzasida rezus-antikorlarni aniqlash usuli. Ushbu test tashxis qo'yish uchun ishlatiladi gemolitik anemiya Rh nomuvofiqligi bo'lgan chaqaloqlarda ...... Izohli lug'at tibbiyotda

Qon zardobida globulinlarning cho'kishiga olib keladigan eritrotsitlar yuzasida rezus antikorlarini aniqlash usuli. Ushbu test Rh nomuvofiqligi bo'lgan chaqaloqlarda gemolitik anemiya diagnostikasi uchun ishlatiladi ... ... tibbiy atamalar

- (antiglobulin testi) tabiiy yoki sun'iy ravishda hujayralar bilan (odatda eritrotsitlar bilan) bog'langan to'liq bo'lmagan absni antiglobulin s ki (A. s.) yordamida aniqlash usuli. A. s., to'liq bo'lmagan Ab ni cho'ktiruvchi, bu jarayonda tashuvchi hujayralarni o'z ichiga oladi, ... ... Mikrobiologiya lug'ati

COOMBS REAKSIYASI- (1921 yilda tug'ilgan ingliz immunologi R. R. A. Kumbs nomi bilan atalgan, antiglobulin testining sinonimi) - antiglobulin zardobi ishtirokida to'liq bo'lmagan avto- va izoantikorlar bilan eritrotsitlarning aglutinatsiyasiga asoslangan serologik reaktsiya. Da… … Psixologiya va pedagogikaning entsiklopedik lug'ati

TRANSFUZIYON GEMOLITIK REAKSIYASI- asalim. Transfüzyon gemolitik reaktsiyasi (THR) - qon va uning tarkibiy qismlarini quyish paytida yuzaga keladigan qabul qiluvchi yoki donor (kamdan-kam hollarda) eritrotsitlarining gemolizi. Reaksiyalar tabiatan immun yoki immunitetsiz bo'lishi mumkin. Etiologiyasi va patogenezi Immun reaksiyalari ...... Kasallik qo'llanma

- (R. R. A. Kumbs, 1921 yilda tugʻilgan, ingliz immunologi) antiglobulin zardobi ishtirokida eritrotsitlarning toʻliq boʻlmagan otoantitelalar va izoantitelalar bilan aglutinatsiyasiga asoslangan serologik reaksiya; transfuziologiyada, sud tibbiyotida, shuningdek ... ... Katta tibbiy lug'at

COOMBS REAKSIYASI- Kumbs testi, qizil qon hujayralari yuzasida o'rnatilgan yoki qon plazmasida mavjud bo'lgan to'liq bo'lmagan antikorlarni aniqlaydigan serologik test. K. r. giperimmunizatsiya natijasida olingan antiglobulin sarumidan foydalanishga asoslangan ... Veterinariya entsiklopedik lug'ati

COOMBS REAKSIYASI- Bir valentli yoki to'liq bo'lmagan antikorlarni aniqlash uchun, xususan, cho'chqalar va boshqa hayvonlarning qon guruhlarini tahlil qilish uchun ishlatiladi ... Qishloq xo‘jaligi hayvonlarining naslchilik, genetikasi va ko‘payishida qo‘llaniladigan atamalar va ta’riflar

Kumbs reaktsiyasiga qarang. (

Anti-rezus antikorlarini aniqlash uchun aglutinatsiya reaktsiyasi ( bilvosita reaktsiya Kumbs)murojaat qiling intravaskulyar gemolizli bemorlarda. Bunday bemorlarning ba'zilarida to'liq bo'lmagan, monovalent bo'lgan anti-rezus antikorlari topiladi. Ular Rh-musbat eritrotsitlar bilan maxsus ta'sir o'tkazadi, lekin ularning aglutinatsiyasiga olib kelmaydi. Bunday to'liq bo'lmagan antikorlarning mavjudligi bilvosita Kumbs reaktsiyasida aniqlanadi. Buning uchun antiglobulin zardobi (inson immunoglobulinlariga qarshi antikorlar) anti-Rh antikorlari + Rh-musbat eritrotsitlar tizimiga qo'shiladi, bu eritrotsitlarning aglutinatsiyasini keltirib chiqaradi. Kumbs reaktsiyasidan foydalangan holda, immun kelib chiqishi eritrotsitlarining tomir ichidagi lizisi bilan bog'liq patologik holatlar, masalan, yangi tug'ilgan chaqaloqning gemolitik kasalligi tashxis qilinadi: Rh-musbat homilaning eritrotsitlari qonda aylanib yuruvchi Rh omiliga to'liq bo'lmagan antikorlar bilan birlashadi. Rh-salbiy onadan platsenta.

Mexanizm. To'liq bo'lmagan (monovalent) antikorlarni aniqlashning qiyinligi shundaki, bu antikorlar ma'lum bir antigen epitoplari bilan bog'langanda panjara tuzilishini hosil qilmaydi va antijenler va antikorlar o'rtasidagi reaktsiya aglyutinatsiya, cho'kma yoki antikorlar bilan aniqlanmaydi. boshqa testlar. Yaratilgan antigen-antikor komplekslarini aniqlash uchun qo'shimcha test tizimlaridan foydalanish kerak. To'liq bo'lmagan antikorlarni aniqlash uchun, masalan, homilador ayolning qon zardobidagi eritrotsitlarning Rh antigeniga, reaktsiya ikki bosqichda amalga oshiriladi: 1) Rh antigenini o'z ichiga olgan eritrotsitlar tekshirilayotgan sarumning ikki barobar suyultirilishiga qo'shiladi. va bir soat davomida 37 ° C da saqlanadi; 2) birinchi bosqichdan so'ng yaxshilab yuvilgan eritrotsitlarga quyonning odamga qarshi antiglobulin sarumini qo'shing (oldindan titrlangan ishchi suyultirishda). 37 ° C da 30 daqiqa davomida inkubatsiyadan so'ng natijalar gemagglyutinatsiya mavjudligi (ijobiy reaktsiya) bilan baholanadi. Reaksiyaning tarkibiy qismlarini nazorat qilish kerak: 1) antiglobulin zardobi + o'ziga xos antikorlar bilan aniq sensibilizatsiyalangan eritrotsitlar; 2) normal zardob + antiglobulin zardobi bilan davolash qilingan eritrotsitlar; 3) Sinov zardobi + antiglobulin zardobi bilan davolash qilingan Rh-salbiy eritrotsitlar.

50. Passiv gemagglyutinatsiya reaksiyasi. Mexanizm. Komponentlar. Ilova.

Bilvosita (passiv) gemagglyutinatsiya reaktsiyasi(RNGA, RPGA) eritrotsitlarni (yoki lateksni) ularning yuzasida adsorbsiyalangan antijenler yoki antitellar bilan ishlatishga asoslangan bo'lib, ularning bemorlarning qon zardobining tegishli antikorlari yoki antijenlari bilan o'zaro ta'siri eritrotsitlarning bir-biriga yopishib qolishiga va uning tubiga tushishiga olib keladi. qisqichbaqasimon cho'kindi ko'rinishidagi probirka yoki hujayra.

Komponentlar. RNHA ishlab chiqarish uchun qo'y, ot, quyon, tovuq, sichqoncha, odam va boshqalarning eritrotsitlaridan foydalanish mumkin, ular kelajakda foydalanish uchun yig'ib olinadi, formalin yoki glutaraldegid bilan ishlov beriladi. Eritrositlar tanin yoki xrom xlorid eritmalari bilan ishlov berilganda ularning adsorbsion qobiliyati ortadi.

RNGAda mikroorganizmlarning polisaxarid antigenlari, bakterial vaksinalar ekstraktlari, viruslar va rikketsiyalarning antigenlari, shuningdek, boshqa moddalar antijen sifatida xizmat qilishi mumkin.

AG tomonidan sensibilizatsiya qilingan eritrotsitlar eritrotsit diagnostikumlari deb ataladi. Eritrosit diagnostikumini tayyorlash uchun ko'pincha yuqori adsorbsion faollikka ega bo'lgan qo'chqor eritrotsitlari qo'llaniladi.

Ilova. RNHA yuqumli kasalliklarni tashxislash, homiladorlik aniqlanganda siydikda gonadotropik gormonni aniqlash, dorilarga, gormonlarga va boshqa ba'zi hollarda yuqori sezuvchanlikni aniqlash uchun ishlatiladi.

Mexanizm. Bilvosita gemagglyutinatsiya testi (RIHA) aglutinatsiya testiga qaraganda ancha yuqori sezuvchanlik va o'ziga xoslikka ega. U patogenni antijenik tuzilishi bilan aniqlash yoki o'rganilayotgan patologik materialda bakterial mahsulotlar - toksinlarni ko'rsatish va aniqlash uchun ishlatiladi. Shunga ko'ra, tanlangan (tanin bilan ishlangan) eritrotsitlar yuzasida o'ziga xos antikorlarning adsorbsiyasi natijasida olingan standart (tijorat) eritrotsitlar antikorlari diagnostikumlari qo'llaniladi. Sinov materialining ketma-ket suyultirilishi plastik plitalarning quduqlarida tayyorlanadi. Keyin, har bir quduqqa antikor yuklangan eritrotsitlarning 3% suspenziyasining teng hajmi qo'shiladi. Agar kerak bo'lsa, reaktsiya turli xil guruhga xos antikorlar bilan yuklangan eritrotsitlar bilan bir necha qator quduqlarga parallel ravishda qo'yiladi.

37 ° C da 2 soat inkubatsiyadan so'ng, natijalar hisobga olinadi, baholanadi tashqi ko'rinish eritrotsitlar cho'kmasi (silkitmasdan): salbiy reaktsiya bilan quduq tubida ixcham disk yoki halqa shaklida cho'kma paydo bo'ladi, ijobiy reaktsiya bilan xarakterli dantelli eritrotsit cho'kmasi, notekis qirralari bo'lgan yupqa plyonka.

Antikorlar eritrotsitlar yuzasida joylashgan bo'lib, u ham statik, ham erkin holatda bo'lishi mumkin qon plazmasi. Antikorlarning holatiga qarab, to'g'ridan-to'g'ri yoki bilvosita Kumbs reaktsiyasi amalga oshiriladi. Agar antikorlar qizil qon hujayralari yuzasida o'rnatilganligiga ishonish uchun asos bo'lsa, to'g'ridan-to'g'ri Coombs testi o'tkaziladi. Bunday holda, test bir bosqichda o'tadi - qo'shiladi antiglobulin sarum. Agar qizil qon hujayralari yuzasida to'liq bo'lmagan antikorlar mavjud bo'lsa, aglutinatsiya eritrotsitlar.

Bilvosita reaktsiya

Bilvosita Kumbs reaksiyasi 2 bosqichda boradi. Birinchidan, sun'iy ravishda amalga oshirish kerak sensibilizatsiya eritrotsitlar. Buning uchun eritrotsitlar va o'rganilayotgan qon zardobi inkubatsiya qilinadi, bu eritrotsitlar yuzasida antikorlarning fiksatsiyasiga olib keladi. Shundan so'ng, Kumbs testining ikkinchi bosqichi - antiglobulin sarum qo'shilishi amalga oshiriladi.

yog'ingarchilik reaktsiyasi - RP (lat. praecipilodan choʻkmaga) - eruvchan molekulyar antigen kompleksining loyqalik koʻrinishidagi antitellar bilan hosil boʻlishi va choʻkishi, deyiladi. cho'kma. U antijenler va antikorlarni ekvivalent miqdorda aralashtirish orqali hosil bo'ladi, ulardan birining ko'pligi immun kompleksining shakllanish darajasini pasaytiradi. Cho'kma reaktsiyasi probirkalarga (halqali cho'kma reaktsiyasi), jellarga, ozuqa muhitiga va boshqalarga qo'yiladi. Agar yoki agarozning yarim suyuq jelida cho'kma reaktsiyalarining turlari keng qo'llaniladi, er-xotin immunodiffuziyaga ko'ra. Ouchterloniya, radium immunodiffuziya, immunoelektroforez va boshq.

Halqali yog'ingarchilik reaktsiyasi. Reaktsiya tor cho'ktiruvchi naychalarda amalga oshiriladi: eriydigan antijen immun zardobida qatlamlanadi. Antigen va antikorlarning optimal nisbati bilan bu ikki eritmaning chegarasida shaffof bo'lmagan qatlam hosil bo'ladi. cho'kma halqasi. Reaksiyada antigen sifatida qaynatilgan va filtrlangan to‘qimalar ekstrakti ishlatilsa, bunday reaksiya I reaksiya-termopresipitatsiya (sibir yarasi haptenini aniqlangan reaksiya) deb ataladi.
Ouchterlony qo'sh immunodiffuziya reaktsiyasi. Reaksiyani yo'lga qo'yish uchun eritilgan agar jeli shisha plastinka ustiga yupqa qatlamga quyiladi va qattiqlashgandan so'ng uning ichida teshiklar kesiladi. Antigenlar va immun zardoblar gelning quduqlariga alohida joylashtiriladi, ular bir-biriga qarab tarqaladi. Ekvivalent nisbatda uchrashish nuqtasida ular oq tasma shaklida cho'kma hosil qiladi. Ko'p komponentli tizimlarda antijenler va antikorlar bo'lgan quduqlar orasida bir nechta cho'kma chizig'i paydo bo'ladi; bir xil AGlarda cho'kma chiziqlari birlashadi; bir xil bo'lmagan AGlarda ular kesishadi.
Radial immunodiffuziya reaktsiyasi. Eritilgan agar jeli bilan immun zardobi stakanga teng ravishda quyiladi. Jelda qattiqlashgandan so'ng, quduqlar hosil bo'ladi, ular ichiga antigen turli xil suyultirishlarga joylashtiriladi. Antigen jelga tarqalib, antitellar bilan quduqlar atrofida halqali yog'ingarchilik zonalarini hosil qiladi. Cho'kma halqasining diametri antigen konsentratsiyasiga mutanosibdir. Reaktsiya qon zardobida turli sinflarning immunoglobulinlarini, komplement tizimining tarkibiy qismlarini va boshqalarni aniqlash uchun ishlatiladi.
Immunoelektroforez- elektroforez va immunopresipitatsiya usulining kombinatsiyasi: antigenlar aralashmasi gelning quduqlariga kiritiladi va elektroforez yordamida gelda ajratiladi, so'ngra immunoserum elektroforez zonalariga parallel ravishda truba ichiga kiritiladi, ularning antikorlari tarqaladi. gel va antigen bilan "uchrashuv" joyida yog'ingarchilik chizig'ini hosil qiladi.
flokulyatsiya reaktsiyasi(Ramon bo'yicha) (lot. f1oecus - jun yormalari) - toksin - antitoksin yoki toksoid - antitoksin reaktsiyasi paytida probirkada opalessensiya yoki loyqa massa (immunoprecipitatsiya) paydo bo'lishi. Antitoksik sarum yoki toksoidning faolligini aniqlash uchun ishlatiladi.

HLA yozish- insonning asosiy gistokompozitsiya kompleksini o'rganish - HLA kompleksi. Ushbu shakllanish 6-xromosomadagi genlar hududini o'z ichiga oladi, ular turli xil immunitet reaktsiyalarida ishtirok etadigan HLA antijenlarini kodlaydi.

Vazifalar HLA yozish juda boshqacha bo'lishi mumkin - biologik identifikatsiya (HLA turi ota-ona genlari bilan birga meros bo'lib o'tadi), moyillikni aniqlash turli kasalliklar, organ transplantatsiyasi uchun donorlarni tanlash - bu holda donor va qabul qiluvchi to'qimalarning HLA tiplash natijalari taqqoslanadi. HLA tiplash yordamida, bepushtlik holatlarini tashxislash uchun to'qimalarga mos keladigan antijenler bo'yicha turmush o'rtoqlar qanchalik o'xshash yoki turlicha ekanligi aniqlanadi.

HLA yozishni taklif qiladi HLA polimorfizmini tahlil qilish va ikki usul bilan amalga oshiriladi - serologik va molekulyar genetik. HLA tiplashning klassik serologik usuli mikrolimfotsitotoksik testga asoslangan bo'lsa, molekulyar usulda PCR (polimeraza zanjiri reaktsiyasi) qo'llaniladi.

Serologik HLA yozish ajratilgan hujayra populyatsiyalarida amalga oshiriladi. Asosiy gistofotsitlar kompleksi antijenlari asosan limfotsitlar tomonidan olib boriladi. Shuning uchun I sinf antigenlarining asosiy tashuvchisi sifatida T-limfotsitlar suspenziyasi, HLA II sinf antigenlarini aniqlash uchun esa B limfotsitlarining suspenziyasi qo'llaniladi. To'liq qondan kerakli hujayra populyatsiyalarini ajratish uchun santrifüj yoki immunomagnit ajratish qo'llaniladi. Birinchi usul noto'g'ri-ijobiy ma'lumotlarga olib kelishi mumkin, deb ishoniladi, chunki bu holda ba'zi hujayralar o'ladi. Ikkinchi usul aniqroq deb tan olingan - hujayralarning 95% dan ortig'i hayotiy bo'lib qoladi.

Ammo limfotsitotoksik testni o'tkazish uchun asos HLA yozish HLA antijenlarining I va II sinflarining turli xil allel variantlariga antikorlarni o'z ichiga olgan o'ziga xos sarumdir. Serologik test zardoblarning qaysi biri limfotsitlar bilan reaksiyaga kirishishini va qaysi biri reaksiyaga kirishmasligini tekshirish orqali HLA turini aniqlash imkonini beradi.

Agar hujayralar va sarum o'rtasida reaksiya yuzaga kelsa, hujayra yuzasida antigen-antikor kompleksi hosil bo'ladi. Komplementni o'z ichiga olgan eritma qo'shilgandan so'ng, liziz va hujayra o'limi sodir bo'ladi. HLA turining serologik testi ijobiy (qizil floresans) va salbiy (yashil floresans) reaktsiyalarni baholash uchun floresan mikroskopiya yoki o'lik hujayralar yadrolarini bo'yash uchun fazali kontrastli mikroskopiya yordamida baholanadi. HLA tiplash natijasi reaksiyaga kirgan sarum va antigenlarning oʻzaro reaksiyaga kirishuvchi guruhlari oʻziga xosligini, sitotoksiklik reaksiyasining intensivligini hisobga olgan holda chiqariladi.

Serologik usulning kamchiliklari HLA yozish o'zaro reaktsiyalarning mavjudligi, zaif antikor yaqinligi yoki HLA antijenlarining past ifodasi, bir qator HLA genlarida protein mahsulotlarining yo'qligi.

Zamonaviyroq, molekulyar usullar HLA yozish allaqachon standartlashtirilgan sintetik namunalar qo'llaniladi, ular leykotsitlar yuzasida antijenler bilan emas, balki DNK bilan reaksiyaga kirishadi va namunada qaysi antijenler mavjudligini bevosita ko'rsatadi. Molekulyar usullar jonli leykotsitlarni talab qilmaydi, har qanday inson hujayrasini o'rganish mumkin va bir necha mikrolitr qon ishlash uchun etarli yoki og'iz bo'shlig'i shilliq qavatidan qirib tashlash bilan cheklanishi mumkin.

Molekulyar genetik HLA yozish PCR usulini qo'llaydi, uning birinchi bosqichi sof genomik DNKni (to'liq qondan, leykotsitlar suspenziyasidan, to'qimalardan) olishdir.

Keyin DNK namunasi nusxalanadi - ma'lum bir HLA lokusuga xos bo'lgan primerlar (qisqa bir zanjirli DNK) yordamida sinov naychasida kuchaytiriladi. Har bir primer juftining uchlari ma'lum bir allelga mos keladigan noyob ketma-ketlikni qat'iy ravishda to'ldirishi kerak, aks holda kuchaytirilish sodir bo'lmaydi.

PCRdan so'ng, takroriy nusxalash paytida ko'p miqdordagi DNK bo'laklari olinadi, ularni vizual ravishda baholash mumkin. Buning uchun reaksiya aralashmalari elektroliz yoki gibridlanishga duchor bo'ladi va dastur yoki jadval yordamida ma'lum bir kuchaytirish sodir bo'lganligi aniqlanadi. HLA tiplash natijasi gen va allel darajalarida keng qamrovli hisobot shaklida taqdim etiladi. Amaldagi namunalarni standartlashtirish tufayli molekulyar HLA yozish aniqrog'i serologik. Bundan tashqari, u ko'proq ma'lumot (ko'proq yangi DNK allellari) va yuqori darajadagi tafsilotlarni beradi, chunki u nafaqat antijenlarni, balki hujayrada qaysi antigen mavjudligini aniqlaydigan allellarni ham aniqlash imkonini beradi.

immun lizis reaktsiyasi. Reaktsiya o'ziga xos antikorlarning hujayralar, shu jumladan eritrotsitlar, bakteriyalar bilan immun komplekslarini shakllantirish qobiliyatiga asoslanadi, bu klassik yo'l bo'ylab komplement tizimining faollashishiga va hujayra lizisiga olib keladi. Immun lizis reaktsiyalaridan gemoliz reaktsiyasi ko'pincha ishlatiladi va kamdan-kam hollarda bakterioliz reaktsiyasi (asosan vabo va vaboga o'xshash vibrionlarni farqlashda) qo'llaniladi.

gemoliz reaktsiyasi. Komplement ishtirokida antikorlar bilan reaktsiya ta'sirida eritrotsitlarning loyqa suspenziyasi yorqin qizil rangga aylanadi. shaffof suyuqlik- gemoglobinning chiqishi tufayli "lak qon". Komplement fiksatsiyasining diagnostik reaktsiyasini (RCC) o'rnatishda gemoliz reaktsiyasi indikator sifatida ishlatiladi: erkin komplement mavjudligi yoki yo'qligi (bog'lanishi) ni tekshirish uchun.

Jeldagi mahalliy gemoliz reaktsiyasi(Jerne reaksiyasi) gemoliz reaksiyasining variantlaridan biridir. Bu sizga antikor hosil qiluvchi hujayralar sonini aniqlash imkonini beradi. Antikorlarni - gemolizinlarni chiqaradigan hujayralar soni eritrotsitlar, o'rganilayotgan limfoid to'qimalarning hujayra suspenziyasi va komplementni o'z ichiga olgan agar jelida paydo bo'ladigan gemoliz plaklari soni bilan belgilanadi.

Immunofluoresans usuli

(RIF, immunofloressensiya reaktsiyasi) - ftorxrom bilan konjugatsiyalangan Ab (Ag) yordamida o'ziga xos Ag (Ab) ni aniqlash usuli. U yuqori sezuvchanlik va o'ziga xoslikka ega. Ekspress d-ki infektsiyalari uchun ishlatiladi. kasalliklar (tadqiqot materialida qo'zg'atuvchini aniqlash), shuningdek, antikorlar va sirt retseptorlari va leykotsitlar markerlarini (immunofenotiplash) va boshqa hujayralarni aniqlash uchun. Toʻgʻridan-toʻgʻri I. m. patologik materialdan yoki ftorxrom bilan konjugatsiyalangan o'ziga xos antikorlarni o'z ichiga olgan mikrobial to-ry bilan to'qimalarning bir qismini yoki smearni qayta ishlashdan iborat; dori bog'lanmagan antikorlarni olib tashlash uchun yuviladi va floresan mikroskop ostida tekshiriladi. Ijobiy holatlarda ob'ektning atrofida nurli immun kompleksi paydo bo'ladi. O'ziga xos bo'lmagan luminesansni istisno qilish uchun nazorat qilish kerak. Da bilvosita. Ular. birinchi bosqichda to'qima kesmasi yoki smear lyuminestsent bo'lmagan o'ziga xos vosita bilan, ikkinchi bosqichda birinchi bosqichda qo'llaniladigan shu hayvonning -globulinlariga qarshi lyuminestsent vosita bilan ishlanadi. Ijobiy holatda, yorug'lik majmuasi hosil bo'ladi, u Ar, At unga va Atga qarshi At (sendvich usuli) dan iborat. Hujayra fenotiplash paytida RIFni hisobga olish uchun lyuminestsent mikroskopga qo'shimcha ravishda, lazerli hujayralarni saralash .

oqim sitometriyasi- hujayra, uning organellalari va unda sodir bo'ladigan jarayonlar parametrlarini optik o'lchash usuli.

Texnika lazer nurlarining tarqalishini hujayra suyuq oqimda o'tganda aniqlashdan iborat va yorug'likning tarqalish darajasi hujayraning o'lchami va tuzilishi haqida tasavvurga ega bo'lishga imkon beradi. Bundan tashqari, tahlil hujayrani (avtofloresans) tashkil etuvchi yoki oqim sitometriyasidan oldin namunaga kiritilgan kimyoviy birikmalarning floresans darajasini hisobga oladi.

Ilgari floresan monoklonal antikorlar yoki floresan bo'yoqlar bilan etiketlangan hujayra suspenziyasi oqim xujayrasi orqali o'tadigan suyuqlik oqimiga kiradi. Shartlar shunday bir tarzda tanlanadiki, hujayralar birin-ketin so'zda tutilgan. reaktivda reaktivning gidrodinamik fokuslanishi. Hujayra lazer nurini kesib o'tganda, detektorlar quyidagilarni qayd qiladi:

kichik burchaklardagi yorug'lik tarqalishi (1 ° dan 10 ° gacha) (bu xususiyat hujayralar hajmini aniqlash uchun ishlatiladi).

yorug'likning 90 ° burchak ostida tarqalishi (yadro / sitoplazma nisbati, shuningdek, hujayralarning heterojenligi va granularligi haqida hukm chiqarishga imkon beradi).

bir nechta floresan kanallarida floresans intensivligi (2 dan 18-20 gacha) - hujayra suspenziyasining subpopulyatsiya tarkibini aniqlash imkonini beradi va hokazo.