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クームス試験の結果。間接クームス反応（抗グロブリン試験、不完全な抗赤血球抗体の検出）、血液。クームス試験でのIgG抗体の検出

赤血球の表面にはたくさんの抗原。これらの抗原の種類に応じて、血液型が区別され、最も研究されているグループはABO、Rh、Kell、Duffyなどです...

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研究の説明

研究の準備：静脈から採血し、自然凝固またはフィブリノーゲンの沈殿により血清（フィブリノーゲンを含まない血漿）を採取します。 教材：血を飲む

赤血球の表面には多数の抗原があります。これらの抗原の種類に応じて、血液型が区別され、最も研究されているグループは、ABO、Rh、ケル、ダフィー、および他の多くのシステムです。通常、他のグループの抗原に対する抗体は血液中に存在しますが、輸血、妊娠、自己免疫疾患などの間に、それらの抗原に対する抗体が見つかります。

方法

間接クームス反応は、抗グロブリン血清を添加したときに現れる、表面に不完全な抗体を持っている赤血球の凝集（接着）の検出に基づいています。

最初の段階では、ドナー赤血球（O（I）グループ、Rh +）とテスト血清が1つのチューブに導入されます。赤血球に対する不完全な抗体が研究対象の血清に存在する場合、それらはドナー赤血球の表面に固定されます。

第2段階では、抗体を含むドナー赤血球（存在する場合）と、ヒト免疫グロブリンに対する抗体を含む標準的な抗グロブリン血清をガラスに塗布します。第一段階で赤血球に対する抗体が赤血球の表面に固定されている場合、標準血清を加えると、抗体の相互作用により赤血球がくっつきます。

参照値-ノルム
（間接クームス反応（抗グロブリン試験、不完全な抗赤血球抗体の検出）、血液）

指標の基準値に関する情報、および分析に含まれる指標の構成は、検査室によってわずかに異なる場合があります！

ノルム：

通常、自分の赤血球に対する抗体は存在しないはずです。Coombs反応が段階的に行われると、赤血球の凝集は起こりません。

適応症

体内の自己免疫反応が疑われる場合の体液性特異的免疫の研究、母親と胎児の間のRh競合、ドナーとレシピエントの血液の適合性の決定

値を増やす（肯定的な結果）

赤血球に対する抗体は、次の場合に検出されます。

1.自己免疫性溶血性貧血

2.新生児溶血性疾患

3. 全身性疾患結合組織

4.慢性活動性肝炎など。

-血液中の不完全な抗赤血球抗体の含有量を決定するのに役立つ研究。この抗グロブリン試験は、妊婦の抗体を検出します。

さらに、それは可能にします初期段階 Rh型不適合の新生児の溶血性貧血を診断する。これは、正常な血液形成に必要な赤血球の破壊を防ぐのに役立ちます。このテストは1945年にRobertCoombsによって作成されたため、その名前が付けられました。

クームス試験は、成人と子供の両方の造血における障害のタイムリーな診断を可能にする多目的な研究です。

このようなテストには次の種類があります。

直接クームス試験-赤血球の表面にある抗体を決定することができます。通常、このような研究は、溶血が疑われる場合、自己免疫性溶血性貧血、およびその他の自己免疫疾患に対して処方されます。また、後に開催されます薬物セラピーキニーネ、ペニシリン、メチルドパをベースにした薬、または輸血後の薬。より正確な結果を得るには、研究の前に、少なくとも1週間前に薬の服用を完全に中止する必要があります。
間接クームス試験-血漿中の抗赤血球抗体を検出できる検査。通常、妊娠中および輸血前に行われます。抗赤血球抗体は、免疫系の反応作用の間に、またはいくつかの反応として人の血液に現れます薬..。より正確な調査のために、2時間間隔で一度に複数のフェンスが実行されます。

の適応症

クームス試験は、深刻な兆候がある場合にのみ実施されます。これは費用と時間のかかる研究であり、特定のテストです。

通常、次の状況は、その実装の兆候と見なされます。

輸血あり..。この検査では、レシピエントの血液が人体に定着するかどうか、また寄付が可能かどうかを判断できます。この場合、ドナーとレシピエントの両方の資料を検討する必要があります。抗体の性質を決定することは重要です。なぜなら、Rh型不適合の背景に対する体内でのそれらの非互換性の場合、それは破壊されるからです。免疫システム..。これは深刻な病気の発症につながり、まれに死に至ることさえあります。
フロント外科的介入失血のリスクがある場合..。これは、医師が適切な血液を即座に注入して体を回復できるようにするために行われます。
Rh感作を識別するため。アカゲザルは、妊娠中にすべての女性の体内で発生する特定の抗原です。母親が正のRhを持ち、父親が負の場合、またはその逆の場合、子供への依存はありません-彼は誰でも継承できます。子供が母親の反対のアカゲザルを受け取った場合、感作のリスクが高くなります。この現象は、母子の血液が混ざり合うことを特徴としています。これは、妊娠中と出産中の両方で発生する可能性があります。

妊娠中の女性の体内でRh型不適合が発生した場合、母親の免疫は胎児を次のように認識し始めます。異物..。このため、彼が攻撃を開始するリスクが高くなります。

そのような行動の結果として、赤ちゃんは深刻な病状を発症する可能性があります。ほとんどの場合、赤芽球症が発生します。これは、子供の体が十分な数の赤血球を生成できない現象です。

さらに、Rh型不適合のため、胎児の死亡は子宮内または出生直後に発生する可能性があります。で正しいアプローチそのような深刻な結果の治療に簡単に回避することができます。

規範からの逸脱

結果がクームス反応に対して陽性である場合、医師は血清中に赤血球に対する抗体があると結論付けます。これは、ドナーの血液が患者の血液と適合できないことを示唆しています。

Rh陰性の血液を持った妊婦の体で陽性の結果が診断された場合、彼女の体には胎児の血液に対する抗体が含まれています。

これは、Rh型不適合について語っています。これには、医師の妊娠管理に対する非常に注意深いアプローチと、女性からのすべての指示と推奨事項の実施が必要です。

子供の血液中に抗体が存在する場合、新生児溶血性疾患と診断されます。この場合、妊娠中の母親の血中の抗体のクエン酸塩の増加が起こるかどうかを決定するために、2番目の研究が行われます。

クームス試験で起こりうる合併症

クームス試験はかなり安全な試験であり、初期段階で多くの自己免疫疾患を診断することができます。合併症を引き起こすことはめったになく、通常は否定的な結果採血に関連しています。

それらは以下で構成されます：

皮膚の下の出血または出血
めまいと失神
感染性汚染

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クームス反応

クームス反応-不完全な抗赤血球抗体を決定するための抗グロブリン試験。クームス試験は、妊婦のRh因子に対する抗体を検出し、赤血球の破壊につながるRh不適合の新生児溶血性貧血を決定するために使用されます。この方法は、1945年に英国の医師Robert Coombsによって提案され、これに関連して、後に「Coombs反応」と呼ばれました。

ダイレクトクームス反応

赤血球の表面にある抗体は、血漿中に静止しているか、遊離している可能性があります。抗体の状態に応じて、直接または間接のクームス反応が実行されます。抗体が赤血球の表面に固定されていると信じる理由がある場合は、直接クームス試験が行われます。この場合、テストは1つの段階で行われます-抗グロブリン血清が追加されます。不完全な抗体が赤血球の表面に存在する場合、赤血球の凝集が起こります。

間接反応

間接的なCoombs反応は2段階で進行します。まず、赤血球の感作を人為的に行う必要があります。このために、研究中の赤血球と血清が培養され、赤血球の表面に抗体が固定されます。その後、クームス試験の第2段階、つまり抗グロブリン血清の添加が行われます。

メモ（編集）

ウィキメディア財団。 2010年。

他の辞書で「Coombsの反応」が何であるかを確認してください。

COUMBESの反応-（クームス試験）赤血球の表面にあるアカゲザル抗体を測定する方法。これにより、血清中にグロブリンが沈着します。このテストは診断に使用されます溶血性貧血 Rh不適合の乳児で...... 辞書医学で

血清中のグロブリンの沈着を引き起こす赤血球の表面上のアカゲザル抗体を測定するための方法。この検査は、Rh不適合の乳児の溶血性貧血を診断するために使用されます...... 医学用語

-（抗グロブリン試験）ki（A。c。）を含む抗グロブリンを使用して、細胞（通常は赤血球）に自然または人工的に関連する不完全な抗体を検出する方法。 A. s。、不完全なAbの沈殿、このプロセスにキャリアが含まれる、.....。微生物学辞書

KUMBSA REACTION-（英国の免疫学者R. R. A. Coombsにちなんで名付けられ、1921年生まれ、同義語-抗グロブリン試験）-抗グロブリン血清の存在下での不完全な自己抗体および等抗体による赤血球の凝集に基づく血清学的反応。で… … 心理学と教育学の百科事典の辞書

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-（R。R. A. Coombs、1921年生まれ、英国の免疫学者）抗グロブリン血清の存在下での不完全な自己抗体および等抗体による赤血球の凝集に基づく血清学的反応。輸血医学、法医学、そしてまた......で使用されています包括的な医学辞典

KUMBSA REACTION-クームス反応、赤血球の表面に固定された、または血漿に含まれる不完全な抗体を検出する血清学的反応。 K.p。過免疫によって得られた抗グロブリン血清の使用に基づく..。獣医百科事典辞書

KUMBSA REACTION-特にブタや他の動物の血液型の分析のために、一価またはいわゆる不完全な抗体を検出するために使用されます... 家畜の繁殖、遺伝学および繁殖に使用される用語と定義

Coombsの反応を参照してください。（（

抗アカゲザル抗体を測定するための凝集反応（間接反応 Coombs）申し込み血管内溶血の患者で。これらの患者の一部では、不完全な一価の抗アカゲザル抗体が見られます。それらはRh陽性赤血球と特異的に相互作用しますが、それらを凝集させません。このような不完全な抗体の存在は、間接クームス試験によって決定されます。これを行うために、抗グロブリン血清（ヒト免疫グロブリンに対する抗体）が抗アカゲザル抗体+ Rh陽性赤血球のシステムに追加され、赤血球の凝集を引き起こします。 Coombs反応を使用して、免疫起源の赤血球の血管内溶解に関連する病的状態が診断されます。たとえば、新生児溶血性疾患です。Rh陽性胎児の赤血球は、血液中を循環するRh因子に対する不完全な抗体と結合します。 Rh陰性の母親から胎盤を通過した。

機構..。不完全な（一価の）抗体を検出することの難しさは、特定の抗原のエピトープに結合するこれらの抗体が格子構造を形成せず、抗原と抗体の間の反応が凝集、沈殿、またはその他によって検出されないという事実によるものです。テスト。形成された抗原-抗体複合体を特定するには、追加のテストシステムを使用する必要があります。たとえば、妊婦の血清中の赤血球のRh抗原に対する不完全な抗体を検出するには、反応を2段階で行います。1）Rh抗原を含む赤血球を2倍に希釈して添加します。血清をテストし、37°Cで1時間維持しました。 2）ウサギ抗ヒト抗グロブリン血清（事前に滴定された作業希釈液）を、最初の段階の後に完全に洗浄された赤血球に添加します。 37°Cで30分間インキュベートした後、血球凝集（陽性反応）の存在によって結果を評価します。反応の成分を制御する必要があります：1）抗グロブリン血清+特定の抗体赤血球によって明らかに感作されます。 2）正常血清+抗グロブリン血清で処理された赤血球。 3）研究された血清+抗グロブリン血清で処理されたRh陰性赤血球。

50.受動的血球凝集の反応。機構。コンポーネント。応用。

間接（受動）血球凝集反応（RNGA、RPGA）は、表面に抗原または抗体が吸着した赤血球（またはラテックス）の使用に基づいており、患者の血清の対応する抗体または抗原との相互作用により、赤血球が試験管の底に付着および落下します。スカラップ状の沈殿物の形の細胞。

コンポーネント。 RNGAの生産には、雄羊、馬、ウサギ、鶏、マウス、ヒトなどの赤血球を使用できます。これらの赤血球は、将来の使用のために採取され、ホルマリンまたはグルタルアルデヒドで処理されます。赤血球の吸着能力は、タンニンまたは塩化クロムの溶液で処理すると増加します。

RNGAの抗原は、微生物の多糖抗原、細菌ワクチンの抽出物、ウイルスやリケッチアの抗原、およびその他の物質である可能性があります。

高血圧によって感作された赤血球は、赤血球診断と呼ばれます。赤血球診断薬の調製には、吸着活性の高いヒツジ赤血球が最もよく使用されます。

応用..。 RNGAは、感染症の診断、妊娠が確立されたときの尿中の性腺刺激ホルモンの測定、薬物、ホルモンに対する過敏症の検出、およびその他の場合に使用されます。

機構..。間接赤血球凝集反応（IRH）は、凝集反応よりも有意に高い感度と特異性を特徴としています。これは、その抗原構造によって病原体を特定するため、または細菌産物（研究対象の病理学的物質中の毒素）を示して特定するために使用されます。したがって、タンニン処理（タンニン処理）赤血球の表面に特定の抗体を吸着させることによって得られる、標準的な（市販の）赤血球抗体診断が使用される。試験材料の段階希釈は、プラスチックプレートのウェルで調製されます。次に、抗体をロードした赤血球の3％懸濁液の同量を各ウェルに添加します。必要に応じて、反応は、異なるグループ特異性の抗体がロードされた赤血球を含むウェルのいくつかの列に並行して配置されます。

37°Cで2時間培養した後、結果を考慮して評価します外観赤血球の沈殿物（振とうなし）：負の反応では、沈殿物はウェルの底にコンパクトなディスクまたはリングの形で現れ、正の反応では、赤血球の特徴的なレースの沈殿物、不均一なエッジを持つ薄膜。

抗体赤血球の表面に位置するものは、静的状態と自由状態の両方である可能性があります血漿..。抗体の状態に応じて、直接または間接のクームス反応が実行されます。抗体が赤血球の表面に固定されていると信じる理由がある場合は、直接クームス試験が行われます。この場合、テストは1つの段階で行われます。抗グロブリン血清..。不完全な抗体が赤血球の表面に存在する場合、凝集赤血球。

間接反応

間接的なCoombs反応は2段階で進行します。まず、人為的に実装する必要があります感作赤血球。このために、研究中の赤血球と血清が培養され、赤血球の表面に抗体が固定されます。その後、クームス試験の第2段階、つまり抗グロブリン血清の添加が行われます。

沈殿反応 -RP（lat praecipiloから沈殿まで）は、可溶性分子抗原と濁りの形の抗体との複合体の形成と沈殿であり、 沈殿物..。抗原と抗体を同量混合することで形成され、そのうちの1つが過剰になると免疫複合体の形成レベルが低下します。沈殿反応は、試験管（リング沈殿反応）、ゲル、栄養培地などで行われます。半液体寒天または寒天ゲルでのさまざまな沈殿反応は、 Ouchterloni、放射線免疫拡散、免疫電気泳動や。。など。

リング沈殿反応..。反応は細い沈殿管で行われます。可溶性抗原が免疫血清に重なっています。抗原と抗体の最適な比率で、不透明沈殿物リング..。煮沸してろ過した組織抽出物を反応の抗原として使用する場合、そのような反応はI反応-熱沈殿（炭疽菌ハプテンが検出される反応）と呼ばれます。
オクタロニー二重免疫拡散反応..。反応を開始するために、溶融した寒天ゲルをガラス板上に薄層で注ぎ、固化した後、その中にウェルを切り出す。抗原と免疫血清は別々にゲルのウェルに入れられ、互いに向かって拡散します。待ち合わせ場所では、同等の割合で、白い縞の形で沈殿物を形成します。多成分系では、抗原と抗体のあるウェルの間に沈殿物のいくつかの線が現れます。同一のAGでは、沈殿物の線が合流します。同一でないAHでは、それらは重複します。
放射状免疫拡散反応。溶融寒天ゲルを含む免疫血清をガラスに均一に注ぎます。固化後、ウェルがゲルに作られ、そこに抗原がさまざまな希釈で入れられます。抗原はゲルに拡散し、ウェルの周りに抗体を含む円形の沈殿ゾーンを形成します。沈殿リングの直径は、抗原濃度に比例します。この反応は、血清中のさまざまなクラスの免疫グロブリン、補体系の構成要素などを決定するために使用されます。
免疫電気泳動-電気泳動法と免疫沈降法の組み合わせ：抗原の混合物をゲルのウェルに導入し、電気泳動を使用してゲル内で分離し、次に免疫核血清を電気泳動ゾーンに平行な溝に導入します。ゲルに拡散し、沈殿ラインの抗原との「会議」で形成されます。
凝集反応（ラモンによる）（ラテン語f1oecusから-羊毛フレーク）-反応毒素-抗毒素またはトキソイド-抗毒素中の試験管内の乳白色または綿状塊（免疫沈降）の出現。抗毒素血清またはトキソイドの活性を測定するために使用されます。

HLAタイピング-主要組織適合遺伝子複合体の研究-HLA複合体。この形成には、さまざまな免疫応答に関与するHLA抗原をコードする第6染色体上の遺伝子の領域が含まれます。

のタスク HLAタイピング非常に異なる可能性があります-生物学的同定（HLA型は親遺伝子とともに継承されます）、素因の決定さまざまな病気、臓器移植のためのドナーの選択-同時に、ドナーとレシピエント組織のHLAタイピングの結果が比較されます。 HLAタイピングの助けを借りて、不妊症の症例を診断するために、配偶者が組織適合性抗原によってどのように類似しているか、または区別できるかが決定されます。

HLAタイピングは HLA多型分析血清学的および分子遺伝学的の2つの方法で実行されます。 HLAタイピングの古典的な血清学的方法は微小リンパ球毒性試験に基づいていますが、分子的方法はPCR（ポリメラーゼ連鎖反応）を使用します。

血清学的 HLAタイピング分離された細胞集団で実施。主要組織適合遺伝子複合体の抗原は、主にリンパ球によって運ばれます。したがって、Tリンパ球の懸濁液はクラスI抗原の主な担体として使用され、Bリンパ球の懸濁液はHLAクラスII抗原の測定に使用されます。全血から必要な細胞集団を分離するには、遠心分離または免疫磁気分離のいずれかを使用します。最初の方法は、一部の細胞の死につながるため、偽陽性データにつながる可能性があると考えられています。 2番目の方法はより特異的であると認識されています-細胞の95％以上が生存し続けています。

しかし、リンパ球毒性検査の基礎は HLAタイピングは、HLAクラスIおよびII抗原のさまざまな対立遺伝子変異体に対する抗体を含む特定の血清です。血清学的検査では、どの血清がリンパ球と反応し、どの血清が反応しないかを調べることにより、HLAタイプを決定します。

細胞と血清の間で反応が起こると、細胞表面に抗原抗体複合体が形成されます。補体を含む溶液を添加すると、細胞の溶解と死が起こります。蛍光顕微鏡を使用して血清学的HLAタイピングテストを評価し、陽性（赤色蛍光）および陰性（緑色蛍光）反応を評価するか、死細胞の核を染色して位相差顕微鏡を評価します。 HLAタイピングの結果は、反応した血清と交差反応する抗原グループの特異性、細胞毒性反応の強度を考慮して導き出されます。

血清学的なデメリット HLAタイピング交差反応の存在、弱い抗体親和性またはHLA抗原の低発現、多くのHLA遺伝子におけるタンパク質産物の欠如です。

より現代的な分子的方法 HLAタイピング白血球表面の抗原とは反応せず、DNAと反応し、サンプルに存在する抗原を直接示す、すでに標準化された合成サンプルが使用されます。分子生物学的手法は生きた白血球を必要とせず、あらゆるヒト細胞を研究することができ、数マイクロリットルの血液で十分に機能するか、口腔粘膜からの掻き取りに制限することができます。

分子遺伝学 HLAタイピング PCR法を使用します。その最初の段階は、純粋なゲノムDNA（全血、白血球懸濁液、組織から）を取得することです。

次に、DNAサンプルがコピーされ、特定のHLA遺伝子座に特異的なプライマー（短い一本鎖DNA）を使用して試験管内で増幅されます。プライマーのペアのそれぞれの末端は、特定の対立遺伝子に対応する固有の配列に厳密に相補的でなければなりません。そうでない場合、増幅は実行されません。

PCR後、複数のコピーの過程で、視覚的に評価できる多数のDNAフラグメントが取得されます。このために、反応混合物は電気分解またはハイブリダイゼーションにかけられ、プログラムまたはテーブルを使用して特定の増幅が起こったかどうかが決定される。 HLAタイピングの結果は、遺伝子および対立遺伝子レベルでの包括的なレポートの形で提示されます。使用するサンプルの標準化により、分子 HLAタイピングより正確には血清学的です。さらに、抗原だけでなく、細胞に存在する抗原を決定する対立遺伝子自体も識別できるため、より多くの情報（より多くの新しいDNA対立遺伝子）とより高いレベルの詳細が提供されます。

免疫溶解反応。この反応は、赤血球、細菌などの細胞と免疫複合体を形成する特定の抗体の能力に基づいており、古典的経路と細胞溶解による補体系の活性化につながります。免疫溶解の反応のうち、溶血の反応が最も頻繁に使用され、溶菌の反応はめったにありません（主にコレラとコレラのようなビブリオの分化において）。

溶血反応。補体の存在下での抗体との反応の影響下で、赤血球の濁った懸濁液は明るい赤に変わります透明な液体-ヘモグロビンの放出による「漆の血」。診断的補体結合反応（CSC）をステージングする場合、溶血反応は指標として使用されます。遊離補体の有無（結合）をテストします。

ゲル中の局所溶血反応（エルン反応）は溶血反応の変種の1つです。それはあなたが抗体産生細胞の数を決定することを可能にします。抗体（溶血素）を分泌する細胞の数は、赤血球、研究中のリンパ組織の細胞懸濁液、および補体を含む寒天ゲルに現れる溶血プラークの数によって決定されます。

免疫蛍光法

（RIF、免疫蛍光反応）-蛍光色素と結合したAb（Ag）を使用して特定のAg（Ab）を検出する方法。高い感度と特異性を備えています。感染症の急行薬に使用されます。疾患（研究における病原体の同定。材料）、ならびにAbおよび表面受容体ならびに白血球（免疫表現型検査）および他の細胞のマーカーの決定のため。 直接I.m。病理学的材料からの組織切片または塗抹標本、または蛍光色素と結合した特定のAbを含むc-coyで切断された微生物を処理することからなる。調製物を洗浄して未結合の抗体がなくなるようにし、蛍光顕微鏡で観察します。陽性の場合、明るい免疫複合体が物体の周辺に沿って現れます。非特異的な蛍光を排除するには、コントロールが必要です。で 間接的に。彼ら。最初の段階では、組織切片または塗抹標本が非蛍光特異的c-coyで処理され、2番目の段階では、最初の段階で使用された動物のグロブリンに対する発光c-coyが処理されます。陽性の場合、Ar、AbからAb、AbからAbからなる発光錯体が形成されます（サンドイッチ法）。発光顕微鏡に加えて、細胞の表現型を決定する際にRIFを考慮に入れるには、 レーザーセルソーター .

フローサイトメトリー-細胞、その細胞小器官、および細胞内で発生するプロセスのパラメーターを光学的に測定する方法。

この技術は、細胞が液体の流れの中でレーザービームを通過するときにレーザービームからの光の散乱を検出することにあり、光の分散の程度により、細胞のサイズと構造を知ることができます。さらに、分析では、細胞を構成する化合物（自家蛍光）またはフローサイトメトリーの前にサンプルに導入される化合物の蛍光レベルが考慮されます。

以前に蛍光モノクローナル抗体または蛍光色素で標識された細胞懸濁液は、フローセルを通って液体の流れに入ります。条件は、いわゆるセルが次々と並ぶように選択されます。ジェット内のジェットの流体力学的集束。細胞がレーザービームを横切る瞬間、検出器は以下を記録します。

小さな角度（1°から10°）での光散乱（この特性はセルのサイズを決定するために使用されます）。

90°の角度での光散乱（核/細胞質の比率、および細胞の不均一性と粒度を判断できます）。

いくつかの蛍光チャネル（2〜18〜20）の蛍光強度-細胞懸濁液の亜集団組成などを決定できます。