coliggでの抗核抗体。 抗核抗体は何のために決定されますか? 全身性結合組織病

HEp-2細胞株(ANF)の抗核因子間接免疫蛍光抗体法により抗核抗体を検出するための検査です。

全身性エリテマトーデス(SLE)およびその他の全身性リウマチ性疾患では、免疫応答は核タンパク質抗原、すなわち 核酸とタンパク質の複合体。 これらの内因性核タンパク質複合体は、上皮細胞のアポトーシスの過程で形成され、外来ウイルス粒子に似ています。 紫外線照射の影響下でのアポトーシス過程の加速、 ウイルス感染薬物、SLEで自己免疫反応を引き起こします。 アポトーシスの間、抗体の主な抗原はアポトーシス小体に凝縮し、自己抗体の標的になります。 現在、抗核抗体と呼ばれる核タンパク質やリボ核酸に対する抗体が約200種類記載されています。 自己免疫疾患では、核抗原に対する自己抗体はヒト細胞に直接的な細胞毒性作用を及ぼしませんが、免疫複合体は、特に腎臓、皮膚、中枢神経系など、血管が特に細い場所で免疫炎症を引き起こす可能性があります、関節の滑膜、胸膜。

抗核因子(ANF)の研究は、抗核抗体を検出するための主な方法であり、核酸(dsDNA、sDNA、RNA)、リボ核タンパク質、およびほとんどのコンフォメーションおよび不溶性抗原に対する自己抗体の検出を可能にします。

抗核抗体は、移植可能なヒト上皮細胞株(HEp-2)の細胞内抗原に結合することによって検出されます。 HEp-2細胞の核と細胞質には、人体に特徴的なすべての抗原が含まれているため、1回の検査ですべての主要な抗核抗体を検出することができます。 HEp2細胞株での間接蛍光抗体法は、ヨーロッパの主要な専門家(EASIgroup2010)およびアメリカの専門家(ACRANATaskforce2008)によって抗核抗体を検出するためのゴールドスタンダードとして推奨されています。 抗核抗体の抗原は多様であるため、抗核抗体の検出のためのイムノアッセイで使用するために、それらのすべてを精製または合成できるわけではありません。

HEp-2細胞株に対するANF陽性は、全身性エリテマトーデス(SLE)、全身性リウマチ性疾患、および多くの自己免疫疾患で観察され、自己免疫病態の患者の検査における普遍的な検査になります。 陽性のANF結果は90%以上の患者で観察されます びまん性疾患 結合組織全身性エリテマトーデスやこの病気の皮膚型、強皮症とその種類、混合性結合組織病、シェーグレン症候群など。 ANFを明らかにする 非常に重要少年の診断で 関節リウマチ自己免疫性肝疾患。 この自己抗体ファミリーの代表は、他の多くの自己免疫(甲状腺炎、糖尿病)、感染性( ウイルス性肝炎)、炎症性および 腫瘍性疾患..。 ANFの発生率は臨床的に1〜3%に達します 健康な人 65歳以上の人ではわずかに増加します。 ANFの力価が高い人は、自己免疫疾患を発症するリスクが高くなります。

適応症:

  • 全身性エリテマトーデス。
  • 亜急性皮膚狼瘡および他の種類の皮膚狼瘡。
  • 混合性結合組織病。
  • シェーグレン症候群および関連疾患。
  • びまん性および限局性強皮症、CREST症候群。
  • 炎症性ミオパチー(多発性筋炎および皮膚筋炎)。
  • 若年性慢性関節炎。
  • 自己免疫性肝炎。
  • 主要な 胆汁性肝硬変硬化性胆管炎。
  • 多発性神経障害と脊髄炎。
トレーニング


午前中の8時間から12時間まで献血することをお勧めします。 空腹時または最後の食事から4〜6時間後に採血します。 ガスや砂糖を含まない飲料水は許可されています。 テストの前夜には、食べ物の過負荷を避ける必要があります。

結果の解釈
測定単位:力価。

参考値:<1:160 (отрицательно).

ANP測定の結果は力価です。これは、コアの有意な蛍光が保持される血清の最終希釈値です。 分数の分母が高いほど、血清の希釈度が高くなり、患者の血清中の抗体が多くなります。 高い血清希釈力価は、高い親和性と自己抗体濃度を反映しています。

高層(1/640以上)の検出は、全身性リウマチ性疾患または自己免疫性肝疾患の可能性が高いことを示しており、臨床、検査、および機器による注意深い検査が必要です。 抗核因子力価の上昇がないため、全身性自己免疫疾患の可能性が大幅に減少します。

低力価(最大1/160)では、抗核因子は健康な個人および全身性疾患の患者の親族の1〜2%で観察されます。 集団における陽性力価の頻度は、年齢とともにわずかに増加します。 低力価の抗核抗体は、多くの自己免疫疾患、感染症、および腫瘍性疾患に見られます。 高力価の抗核抗体がないことで、全身性リウマチプロセスの可能性が大幅に減少し、診断を確認するのではなく除外するために使用できます。

同義語: ANA、抗核抗体、抗核因子、ANF、抗核抗体、ANA、蛍光抗核抗体、抗核因子、ANF

科学編集者:M。Merkusheva、サンクトペテルブルク州立医科大学にちなんで名付けられました acad。 パブロバ、一般内科。

自己免疫疾患は、免疫系が体自身の組織を攻撃する場合、最も危険なものの1つと見なされます。 ほとんどの自己免疫疾患は慢性的であり、内臓やシステムの機能に深刻な障害を引き起こす可能性があります。

自己免疫状態の診断に使用される最も一般的な検査の1つは、抗核抗体(ANA)スクリーニングです。これは、次の3つの方法で行われます。

  • ELISA法(総ANAレベルが決定されます)、
  • RNIFの間接蛍光抗体法の反応法による(最大15種類のANAが検出されます)
  • イムノブロッティングの方法によって。

一般情報

抗核(抗核)抗体は、体自身の細胞の核と反応してそれらを破壊する自己抗体のグループです。 したがって、ANAの分析は、自己免疫疾患の診断においてかなり感度の高いマーカーと見なされ、そのほとんどは結合組織への損傷を伴います。 ただし、抗核抗体の種類のいくつかは、非免疫病因の疾患にも見られます:炎症性、感染性、悪性など。

最も特異的な抗核抗体は、以下の疾患に対するものです。

  • 全身性エリテマトーデス(SLE)-皮膚および結合組織の疾患;
  • 皮膚筋炎-皮膚、筋肉、骨格組織などへの損傷;
  • 結節性動脈炎-動脈血管壁の炎症;
  • 強皮症-結合組織の硬化と硬化;
  • 関節リウマチ-関節の結合組織への損傷;
  • シェーグレン病-腺症状を伴う組織損傷(涙腺および唾液腺の分泌の低下)。

抗核抗体は、慢性再発性肝炎の患者の3分の1以上で検出できます。 また、次の場合、ANAのレベルが上がる可能性があります。

  • 伝染性単核球症(ウイルス性疾患、内臓への大規模な損傷を伴う);
  • 急性および慢性型の白血病(悪性血液疾患);
  • 溶血性貧血(赤血球の破壊の結果としての貧血);
  • ワルデンストレーム病(骨髄損傷);
  • 肝硬変(肝臓組織の構造の変化に関連する慢性疾患);
  • マラリア;
  • ハンセン病(皮膚感染症);
  • 血小板減少症(血小板産生の減少);
  • リンパ増殖性病変(リンパ系の腫瘍);
  • 重症筋無力症(病的な筋倦怠感);
  • 胸腺腫(胸腺からの腫瘍)。

酵素免疫測定法の過程で抗核抗体を測定すると同時に、免疫グロブリンの濃度を評価します:IgA、IgM、IgG。 血液中のこれらの成分の検出は、リウマチ性疾患および膠原病を発症する可能性が高いことを示している可能性があります。

抗体の濃度と患者の症状との関係が見つからない場合、血中の抗核抗体の存在自体が診断基準であり、治療法の選択に影響を与える可能性があります。 治療期間が延長された高レベルの抗核抗体の持続は、疾患の予後が悪いことを示しています。 治療中のANA値の低下は、寛解(より頻繁に)または差し迫った死(より少ない頻度)を示している可能性があります。

また、抗核抗体は、65歳まで(症例の3-5%)、65歳以降(37%まで)の健康な人で検出できます。

適応症

以下の場合には、抗核因子を調査することをお勧めします。

  • 顕著な症状のない自己免疫および他のいくつかの全身性疾患の診断;
  • 全身性エリテマトーデスの複雑な診断、その形態と病期、ならびに治療戦術の選択と予後の確認。
  • 薬剤誘発性ループスの診断;
  • エリテマトーデスと診断された患者の予防検査;
  • 特定の症状の存在:原因が確定していない長期の発熱、関節の痛みや痛み、筋肉、皮膚の発疹、倦怠感の増加など。
  • 全身性疾患の症状の存在:皮膚または内臓(腎臓、心臓)の損傷、関節炎、てんかん発作およびけいれん、発熱、不当な発熱など。
  • ジソピラミド、ヒドララジン、プロパフェノン、プロカインアミド、ACE阻害剤、ベータ遮断薬、プロピルチオウラシル、クロルプロマジン、リチウム、カルバマゼピン、フェニトイン、イソニアジド、ミノサイクリン、ヒドロクロロチアジド、スタチンによる薬物療法の処方。薬剤誘発性ループスを発症するリスクがあるため。

誰が指示を与えるか

一般開業医に加えて、

  • リウマチ専門医、
  • 皮膚静脈科医、
  • 腎臓内科医、
  • 小児科医。

ANAの基準と影響要因

通常、血漿中の抗核抗体は存在しないか、少量検出されます。 結果は、テストの実行方法によって異なります。

1.テストはELISAによって行われました

  • 0.9ポイント未満-負(通常);
  • 0.9から1.1ポイント-疑わしい(7〜14日以内にテストを繰り返すことをお勧めします)。
  • 1.1ポイント以上-ポジティブ。

2. RNIFの定量分析では、1:160未満の力価が標準と見なされます。
3.イムノブロッティング-「検出されない」基準(一般的な結論/各タイプの抗体とは反対)。

結果に影響を与える可能性のあるもの

  • 患者による準備規則または医療従事者による静脈穿刺のアルゴリズムの違反。
  • 薬の服用(カルバマゼピン、メチルドパ、ペニシラミン、トカイニド、ニフェジリンなど);
  • 患者の尿毒症の存在(タンパク質代謝産物による中毒)は、偽陰性の結果をもたらす可能性があります。

重要!結果の解釈は常に包括的な方法で実行されます。 1つの分析だけで正確な診断を行うことは不可能です。

血中の抗核抗体(陽性)

抗核抗体の検出は、以下の病気を示している可能性があります。

  • 全身性エリテマトーデス;
  • 自己免疫性の膵炎(膵臓の炎症);
  • I型糖尿病;
  • 甲状腺の自己免疫病変;
  • 内臓の悪性病変;
  • 自己免疫性肝炎;
  • 結合組織病;
  • 重症筋無力症;
  • びまん性間質性線維症(肺組織への慢性的な損傷);
  • レイノー症候群(小末端動脈の虚血)など。

定量的酵素免疫測定法(RNIF)におけるANA力価の増加は、次のことを示しています。

  • 活動期の全身性エリテマトーデス-力価は98%に増加します。
  • クローン病(消化管の肉芽腫性病変)-約15%;
  • 潰瘍性大腸炎(結腸粘膜の炎症)-50〜80%;
  • 強皮症;
  • シェーグレン病;
  • レイノー病-最大20%;
  • シャープ症候群(混合性結合組織病);
  • 薬用狼瘡。

重要!分析を解読するとき、否定的な結果が特徴的な症状を持つ患者の自己免疫疾患の存在を排除しないことを理解することが重要です。 自己免疫プロセスの臨床像のない陽性結果は、他の臨床検査からのデータを考慮に入れて解釈されなければなりません。

トレーニング

抗核因子のELISA用生体材料-静脈血血清。

  • 静脈穿刺は朝と空腹時に行われます(最後の食事から少なくとも8時間経過している必要があります)。 あなたはきれいな非炭酸水を飲むことができます。
  • 採血の直前(2〜3時間前)にニコチン代替物(パッチ、スプレー、チューインガム)を喫煙して使用することはお勧めしません。
  • 前夜と手術当日は、アルコール飲料やエナジードリンクを飲んだり、心配したり、肉体的な仕事をしたりしてはいけません。
  • 検査の15日前に、主治医の同意を得て、薬(抗生物質、抗ウイルス薬、ホルモンなど)の摂取がキャンセルされます。
  • 信頼できる結果を得るには、2週間後に分析を繰り返すことをお勧めします。

ELISA応答は、静脈穿刺後1日以内、および緊急事態では、検査が「cito」によって実行される場合、約3時間で期待できます。

出典:

  • 実験室のInvitroおよびHelixのサイトからの情報。
  • 米国国立医学図書館PubMedからのデータ。

その他のリウマチスクリーニング検査

>血液中の抗核因子(ANF)の含有量の測定

この情報はセルフメディケーションには使用できません。
専門家との相談が不可欠です!

ANFとは何ですか?

一部の人々の体では、欠陥のある上皮細胞の遺伝的にプログラムされた崩壊が起こり、その結果、核タンパク質自己抗原が形成されます。 外来ウイルス粒子との類似性により、抗核抗体と呼ばれる自己抗体が形成されます。 その結果、免疫複合体(抗原+抗体)が形成され始め、 免疫炎症特に薄い場所で 血管(腎臓、関節の滑膜、皮膚、胸膜、中枢 神経系)。 このプロセスは、全身性エリテマトーデス、リウマチ性疾患、シェーグレン症候群(結合組織への自己免疫損傷)およびその他の疾患に典型的です。

抗核因子(ANF)の含有量の測定は、血液中の抗核抗体の検出です。 後者は健康な人の1〜3%で発生する可能性があります。 人が年をとるにつれて、血中のANFの含有量は、原則として増加します。

ANFの決定のための適応症

医師が処方する この研究自己免疫疾患を発症および診断するリスクを特定するため。 ANFの分析は、全身性エリテマトーデス、エリテマトーデス、結合組織病、ミオパチー、多発性神経障害、強皮症(小血管の病変)の患者に適応されます。 自己免疫性肝炎、ある種の肝硬変、硬化性胆管炎(炎症)に処方されます 胆管)、および若年性関節炎を伴う。

血液中のANFの含有量を測定することで、医師は病気の進行を監視し、必要に応じて治療を調整することができます。

どこでテストでき、どのように準備できますか?

リウマチ専門医、免疫学者、肝臓専門医、セラピストがこの研究に派遣されます。 専門の免疫学センターと、分析に必要な分析装置やその他の機器を備えた研究所の両方で合格することができます。

静脈からの血液サンプルは、少なくとも4時間の絶食後に採取する必要があります。

結果の解釈

血中のANFはクレジットで測定されます。 ANFが測定される血清の希釈を示す画分の分母が高いほど、血中の抗体が多くなります。

1/640からの力価は、リウマチ性または自己免疫疾患の可能性が高いことを示しています。 全身性疾患の動的モニタリングの場合、ANF力価の増加は通常、病理学的プロセスの悪化を示します。

一部の健康な人、特に全身性疾患に苦しんでいる親戚がいる場合は、低力価のANF(最大1/160)が検出されます。 非常に低い力価は、多くの自己免疫疾患、腫瘍性疾患、および感染症の患者に見られます。

分析中の抗体価に加えて、実験助手は説明します 他の種類それぞれが特定の病気の特徴である細胞核の抗体発光によって引き起こされます。

分析のデメリット

血液中のANPの含有量を測定することにより、抗核抗体の種類が多いため、すべての抗核抗体を検出できるわけではありません。 したがって、信頼性の低い分析結果を除外するために、以下を実行することをお勧めします。 実験室研究 ELISAおよび間接免疫蛍光法と同時に。

高い抗体価がないことは、全身性疾患がないことを示すものではなく、それらの存在または発生の可能性を減らすだけです。

長い間、抗核因子について書きたかったのですが、何かがいつも私を止めていました。 どうして? まあ、それについて書くことは広大さを把握しようとしているので、簡潔さは明らかに私の才能の姉妹ではありません)))

抗核因子(ANF)の測定は、抗核抗体を検出するための主な方法であり、ほとんどの種類の抗核抗体の検出を可能にします。 ANF測定の結果は、自己抗体の存在、血清希釈の最終力価、および細胞核の発光のタイプの事実そのものです。

ANFは1つの抗体ではありません!

ANPを検出する方法は、Tan(1982)によって開発され、ヒトの移植可能な類上皮細胞株HEp-2を基質として使用しました(分析フォームにこの名前が表示されている場合があります)。 この細胞株は、ヒト喉頭の腫瘍(腺癌)に由来します。 この系統の比較的気取らない、大きな核およびすべてのヒト抗原の存在は、連続細胞株HEp-2を使用する間接免疫蛍光(nRIF)の方法をANPを検出するための主要な方法にしました。

他の細胞株も基質として使用できます(カルーセルを参照)。ただし、その良好な形態と培養の容易さにより、間接免疫蛍光抗体法で一般的に認識されている基質となったのはHep-2株です。 英文学では、この方法はFANA(蛍光抗核抗体検出)と呼ばれることもあります。

「抗核抗体」という用語の下で、免疫学的検査室は、酵素免疫測定法と免疫化学的分析の方法、および免疫蛍光法の両方に基づく検査を指すことがあります。
抗核因子(ANF)は、蛍光抗体法によって検出される抗体です。
他のクラスの免疫グロブリンによって表されるANFの同定には独立した重要性がないため、IgGクラスのANFを検出する必要があります。

ANF力価は、患者の血清の最後の希釈として定義され、細胞核の明確な蛍光(発光)があります。 HEp-2細胞株を使用する場合は、初期力価1:80を使用することをお勧めします。この場合、通常のANF力価は1:160未満です。 最終的な力価を決定するために、通常、x2のステップで滴定が使用されます(1:160-1:320-1:640-1:1280-1:2560-1:5120など)。

疾患の悪化を背景に、通常、1:640を超えるANF力価が認められ、寛解すると、力価は1:160-1:320に低下する可能性があります。

検出結果のスコアリング(「クロス」+++)により、ラボは試薬を節約し、研究の人件費を削減できます。 この場合、最終的な力価を決定することはできません❌

すべての陽性患者の最終力価を決定することが望ましい。これにより、血清中の自己抗体の存在を明らかにすることが可能になり、これはプロセスの活性により密接に関連している。

グローコアタイプ

核の輝きのタイプは、ANFを検出する際の重要な特性の1つです。 各タイプの抗核抗体(ANA)は細胞内に特定の標的を持ち、患者の血清と細胞内の構造との相互作用を反映しています。 発光の種類は、血液中の特定の自己抗体の存在に依存します。これに基づいて、この血清に存在するこれらの種類の抗体に関して予備的な結論を出すことができます。 細胞核の発光のタイプは、ANFを検出するための情報量を大幅に増加させます。

HEp-2細胞を使用すると、核染色の20を超える異なる変異体を特徴づけることができますが、臨床診療では、主要なものを特定するだけで十分です。 それぞれのタイプのグローには非常に 特徴的な兆候あるオプションを別のオプションと区別します。

均質なタイプのグロー自己抗体は、核内に拡散して分布している抗原と反応します。 クロマチンの一部です。

どういう意味ですか? ヌクレオソーム、DNA、ヒストンに対する抗体。

いつ? SLEおよび薬剤誘発性ループスの患者、ならびに強皮症の患者。

多くの場合、均一なタイプの蛍光を伴う高力価のANPの検出は、SLEの診断を示します。

ペリフェラルグロータイプ均質な種ですが、別々に分離することができます。 末梢型の発光は、二本鎖DNAに対する抗体を持つ患者に見られ、主にSLE、肝疾患で検出されます。

粒状タイプ(斑点、メッシュ)最も一般的であると同時に、最も 非特定。

どういう意味ですか? Sm、U1-RNP、SS-A、SS-B抗原およびPCNA。

いつ? SLE、シェーグレン病/症候群、強皮症、皮膚筋炎/多発性筋炎、RAおよび他の多くの疾患。 低力価(1:160-1:320)粒状タイプの蛍光を伴うANFは、全身性疾患の兆候がなく、臨床的に健康な個人の血清中に存在する可能性があります。

大きな顆粒型の核蛍光を伴う非常に高い力価のANP(1:2560-1:10000)の検出は、通常、診断を示し、RNP抗原を特定するために追加の検査が必要です。

核小体抗原はANAの標的として機能し、 核小体タイプの蛍光。

どういう意味ですか? RNAポリメラーゼ1、NOR、U3RNP、PM / Scl。

いつ? 強皮症とその品種。

セントロメア型染色体セントロメアに対する抗体が出現する場合に注目され、分裂中の細胞にのみ見られます。 その存在は、CREST症候群(強皮症の変種)に典型的です。

細胞質型の輝き。

どういう意味ですか? 多発性筋炎で認められるtRNAシンテターゼ、特にJo-1に対する抗体。 さらに、それは細胞質の他の成分に対して向けられたANAの患者で検出されます:自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変。

他の多くのタイプのグローを特徴づけることができます。 Scl-70に対する抗体は きめ細かい核および核小体の染色、抗p80-有糸分裂細胞には存在しない核内の輝点。

いくつかのタイプの発光の組み合わせがしばしば発生する可能性があります。たとえば、Scl-70に対する抗体の特徴である小顆粒と核です。

低希釈では、たとえば顆粒状の1種類の蛍光が優勢になることがあり、さらに希釈すると、均一またはセントロメア型の蛍光が現れます。これは、患者の血清中に存在することを示します。 他の種類 ANA。