生体材料の受け入れ、ラベル付け、登録の組織。 PCR研究のための生体材料の採取方法PCR技術

分析のために特定の局在(膣、尿道、子宮頸管など)を調査する必要性に関する決定は、患者の苦情の全体に基づいて主治医によって行われます。 臨床像客観的な結果を得るには、研究対象の臨床材料に、可能な限り多くの上皮細胞と最小限の粘液および血液不純物が含まれている必要があります(血液および粘液の形での不純物の適度な存在は許容されます)。 生体材料の不適切なサンプリングは、信頼できる結果を得ることが不可能になり、その結果、繰り返しサンプリングする必要が生じる可能性があります。生体材料。

輸送媒体を使用して臨床材料を試験管に入れる手順:

1.チューブの蓋を開けます。

2.使い捨て滅菌プローブを使用して、適切な排出量を取得します

ビオトープ(膣、尿道、子宮頸管)。

3.プローブがチューブの底に当たったら、1.5 mlの輸送媒体を備えたチューブに臨床材料を入れたプローブを移し、さらに力を加えてプローブの薄い部分を切り欠きまで曲げ、次に壊します。複数のビオトープから臨床材料を入手する必要がある場合は、新しいプローブを備えた臨床材料を新しいチューブに入れるたびに、この手順を繰り返します。

3.蓋、ラベルでチューブをしっかりと閉じます。

子宮頸管から臨床材料を採取する特徴:

1.子宮頸管の臨床材料は、婦人科検鏡を尿道プローブまたは子宮頸部サイトブラシを使用して膣に挿入した後に得られます(HPV検査には十分な数の上皮細胞が必要です!)。

2.臨床材料を採取する前に、子宮頸管の開口部を滅菌ガーゼ綿棒で慎重に処理してから、子宮頸部を滅菌生理食塩水で処理する必要があります。

3.尿道プローブを子宮頸管に1.5cm導入した後、尿道プローブを数回回転させ(時計回りに2〜3回転)、取り外します。 プローブを取り外すときは、膣の壁に触れることを完全に排除する必要があります。

4.得られた臨床材料は、輸送媒体を備えた試験管に入れられます(上記を参照)。

膣から臨床材料を採取することの特徴:

検査当日、女性は性器トイレや膣洗浄を行わないでください。

1.膣からの臨床材料は、上皮の表面からこすることによって、膣または尿道プローブを使用して、後部または外側の円蓋から得られます。

2.臨床資料は、手動検査の前に入手する必要があります。

3.操作の前に、婦人科の鏡を温水で湿らせることができます。鏡を処理するための消毒剤の使用は禁忌です。

4.女の子(おとめ座)では、婦人科の検鏡を使用せずに、膣の前庭の粘膜から臨床材料を入手します。

5.得られた臨床材料は、輸送媒体を備えた試験管に入れられます(上記を参照)。

女性の尿道から臨床材料を採取することの特徴:

1.尿道からの臨床材料は、尿道プローブを使用して取得されます。

2.臨床材料を服用する前に、患者は1.5〜2時間排尿を控えることをお勧めします。

3.尿道分泌物が自由に存在する場合は、尿道の外部開口部を綿棒で洗浄する必要があります。

4.自由な分泌物がない場合は、尿道の穏やかなマッサージを行うことができます。

5.器具を尿道に1cmの深さまで挿入した後、尿道の後壁と側壁をわずかに押して、外部開口部まで前進させる必要があります(回転運動は痛みを伴います)。

6.得られた臨床材料は、輸送媒体を備えた試験管に入れられます(上記を参照)。

いくつかのビオトープから得られた材料を研究するために、新しい滅菌プローブと新しいチューブを使用するたびに、この手順が繰り返されます!!!

子宮頸管、膣内容物、尿道の材料を1本の試験管に混ぜることは許されません。

男性の尿道から臨床材料を採取することの特徴:

1.5〜2時間。 泌尿生殖器に一過性のミクロフローラが存在することによる男性の泌尿生殖器のミクロフローラの組成を決定する結果の歪みを避けるために、生体材料を服用する前に3日間性的禁欲または保護された性的接触の使用をお勧めします。

1.尿道からこすり取る前に、陰茎の頭を尿道の外部開口部の領域で、滅菌生理食塩水で湿らせたタンポンで処理します。

2.尿道のマッサージをします。 尿道から分泌物が自由に流れる場合は、乾いた綿棒で尿道を取り除きます。

3.プローブを尿道に1〜2cmの深さまで挿入します。数回の回転運動で上皮細胞の掻き取りを行い、プローブを輸送媒体の入った試験管に移し、切り離して放置します。 排出量は十分に取られています。 粘液、血液、膿の形で不純物が適度に存在することは許容されます。

臨床資料の取得 亀頭の包皮(PFC):

生体材料を服用する前に、患者は排尿を控えることをお勧めします

1.5〜2時間。

1.使い捨てプローブを使用して、上皮細胞の掻き取りは、対応するビオトープから行われます( 包皮陰茎亀頭、包皮嚢)そしてプローブを輸送媒体を備えた試験管に移し、切り離して去ります。

生体材料の保管および輸送条件:

1.受け取った臨床材料が入ったチューブにラベルを付ける必要があります。

2.添付の指示書には、氏名、患者の年齢、臨床資料、推定診断、検査の適応、サンプリングの日時、送信機関(部門)の名前を記載する必要があります。臨床資料。

3.臨床材料を採取してから検査室に届けるまでの輸送時間が1日以内の場合、臨床材料が入った試験管を保管し、検査室に配送する必要があります。家庭用冷蔵庫の温度(+ 4 + 10°С)、凍結なし。

4.臨床サンプルを24時間以内に検査室に届けることができない場合は、臨床材料のサンプルを1回凍結し、-20°Cの温度で最大1か月間保管することができます。

    臨床材料の選択は、医療従事者が抗エピデミックレジームの規則に従って、使い捨て手袋を着用した滅菌使い捨て器具(注射器、適切なプローブ、サイトブラシなど)のみを使用して行います。

    適切なアプリケーター(プローブ、サイトブラシ)を使用して、選択した遺伝子座から可能な限り材料を収集します(臨床サンプルの適切性を確保するため)。

    PCRラボから提供された信頼性の高い輸送培地と防腐剤を使用して、得られた材料(微生物のDNA / RNA)を保存します。 臨床材料の輸送および保管用の培地は、室温で最大28日間のRNAおよびDNAの安定性を保証します。

    採取した材料をEDTA(血液)を入れたバクエット、使い捨ての化学的に純粋なエッペンドルフチューブ(塗抹標本、脳脊髄液、生検など)に入れます。 材料を収集するための主な条件は、サンプルへのDNaseおよびリボヌクレアーゼの侵入を防ぐことです。 リボヌクレアーゼとDNaseは、RNAとDNAを分解するための酵素です。 それらは環境中で非常に安定しており、長時間の沸騰に耐えることができます。 ヌクレアーゼの主な供給源は 、ほこりの粒子。 プラスチック製のチューブとチップには、「DNase、RNaseフリー」(ヌクレアーゼフリー)のラベルを付ける必要があります。

    採取後すぐに、キャップの内面と内面に触れずに、試験管、臨床材料の入ったバイアルをしっかりと閉じます。

    臨床材料を扱うとき、チューブ、バイアルを開くときは、突然の動きをしないでください。また、サンプルや作業面の汚染につながる可能性のある水しぶきや水しぶきを許可しないでください。

    相互汚染を避けるために、サンプルは別のビニール袋またはラックに保管して輸送してください。 転送が必要な場合は、使い捨ての使い捨てチップとエアロゾルバリアを備えた自動マイクロピペットを使用してください。

    PCRラボに輸送する前に、選択した生体材料を2〜4°Cの温度で48時間以内に保管してください。 サンプル採取からPCR分析までの時間を最小限に抑える必要があります。 サンプルは、クーラーバッグ、サーマルコンテナー、サーマルパック付きの魔法瓶、氷またはドライアイスで輸送されます。

血液、血漿、血清

真空システムを使用して採血することをお勧めします。 このようなシステムの導入により、血液の操作を標準化することが可能になり、検査室の研究のすべての段階にプラスの効果があり、一般に、検査室の作業が別のより高いレベルの品質に移行します。 それらの使用は、感染からの人員の保護を保証し、採血手順に費やされる時間を短縮し、溶血を伴うことがはるかに少なく、血液サンプルの無菌性を維持し、気密に輸送することを可能にします。

肘正中皮静脈から抗凝固剤を含む特別な真空管に空腹時に静脈穿刺を行うことをお勧めします。その後、管を裏返して数回混合します。 血液チューブは+ 4°C- + 8°Cの冷蔵庫に保管してください。 血液の最大貯蔵寿命は1日です(凍結しないでください!)。 長期保存が必要な場合は、血清または血漿を1ml取り、-16°-20°Cの温度で2週間以内に保存する必要があります。

PCR診断に使用される真空システムの特徴:

    EDTAを含むVakuets(6%)-定性的および定量的研究に使用されます。 EDTA抗凝固剤は細胞の核酸をしっかりと固定します。

    クエン酸ナトリウム(3.8%)を含むVakuets-定性的および定量的研究に使用されます。 長期輸送には適していません。 クエン酸塩は、外来の微生物叢に適した栄養培地です。

    抗凝固剤を含まない真空(血清)-定性的研究に使用されます。 定量的研究に血清を使用することは望ましくありません。 感染性病原体の一部は血栓に定着しますが、血液中のその定量的含有量を決定する能力は低下します。

    ヘパリンを含む真空は、PCR反応にはまったく適していません。 ヘパリンはDNAと同様にポリアニオンであるため、PCR反応でDNAと競合します。



血液検査の最適な時間は、採取後1〜4時間の間隔です。5〜30分の間隔で、血小板は一時的に抗凝固剤とその凝集に順応し、血液サンプルの誤った減少につながる可能性があります。

採血後8時間以降に血液を検査することは望ましくありません。 細胞のいくつかの特性が変化します:白血球の量が減少し、赤血球の量が増加し、最終的に誤った測定結果と結果の誤った解釈につながります。 ヘモグロビンの濃度と血小板の数だけが、血液の貯蔵日中安定しています。

血液を凍らせてはいけません。 K 2 EDTAを含む毛細血管の血液は、室温で保存し、採取後4時間以内に分析する必要があります。

質の高い研究成果を確保するためには、分析前にサンプルの保管時期や保管条件を厳しく管理する必要があります。

遅延分析(長距離輸送、装置の技術的故障など)を行う必要がある場合、血液サンプルは冷蔵庫(4 o -8 o C)に保管され、24時間以内に検査されます。 ただし、細胞の腫れとその体積に関連するパラメータの変化があることに留意する必要があります。 実際に健康な人では、これらの変化は重要ではなく、量的パラメーターに影響を与えませんが、病理学的細胞の存在下では、血液を採取した瞬間から数時間以内に変化するか、破壊されることさえあります。

研究の直前に、血液を数分間完全に混合して、抗凝固剤を希釈し、血漿中に形成された元素を均一に分布させる必要があります。 病理学的細胞の損傷や崩壊の可能性があるため、研究の瞬間までサンプルを長期間絶えず攪拌することはお勧めしません。

自動分析装置での血液検査は、室温で行われます。 冷蔵庫に保存された血液は、低温で血液の粘度が上昇し、成形された要素がくっつく傾向があるため、最初に室温まで温める必要があります。これにより、混合が妨げられ、溶解が不完全になります。 冷血の研究は、白血球ヒストグラムの圧縮により「警報」を引き起こす可能性があります。

採血場所からかなり離れた場所で血液学的研究を行う場合、不利な輸送条件に関連する問題が必然的に発生します。 機械的要因(振とう、振動、攪拌など)、温度条件、サンプルのこぼれや汚染の可能性の影響は、分析の品質に影響を与える可能性があります。 これらの理由を排除するために、血液を含む試験管を輸送する場合は、密閉されたプラスチック管と特別な輸送等温容器を使用することをお勧めします。 輸送中は、生物学的安全規則に従い、サンプル(天然素材と)および紹介フォームとの接触は許可されていません。

^ 4.3。 生物学的材料の受け入れと登録

静脈血サンプルの入ったチューブは、収集日に、生物学的材料を配送するための特別なバッグに入れてラックに入れて研究所に配送します。このバッグでは、チューブを直立させ、遠隔距離を移動する場合は、特別な容器に入れます。

材料を受け取る実験室の従業員は、以下を確認する必要があります。

紹介の正確さ:紹介フォームには、受験者のデータ(名前、名前と父称、年齢、病歴番号または外来カード、部門、診断、実施された治療)が含まれています。

血液サンプルによるチューブのラベル付け(研究用の資料を送るためのフォームのコードと名前と同じ、患者のコードまたは名前でマークする必要があります)。 検査技師は、納品された材料を記録し、チューブの数を記録する必要があります。

^ 4.4血液分析装置での血液の細胞組成の計算

血液分析装置での血液の細胞組成の計算は、装置の指示に厳密に従って実行する必要があります。

血液分析装置で作業するときは、次のことを行う必要があります。

血液学的研究(単純または真空)用の特定の塩および使い捨てチューブに推奨される比率でK-2EDTAで安定化された血液を使用します。

分析の前に、注意深く、しかし完全に試験管を血液と混合します(血液サンプルを混合するための装置を使用することをお勧めします-この目的のためにrotomix)。

に登録されている試薬を使用する 確立された秩序; 他のメーカーの製品の試薬を変更する場合は、機器をチェックして校正する必要があります。

デバイスを起動し、フラッシングのすべての段階を観察し、すべてのチャネルのインジケーターのゼロ(バックグラウンド)値を達成します;

発生する可能性のある系統的エラーに関する機器メッセージに注意してください。MCSSの増加が大きいことを忘れないでください。 通常値通常、測定誤差の結果。

エラーが検出された場合は、原因を取り除くことが不可欠です。障害のあるデバイスでは動作しないでください。

適切なプログラムに従って品質管理手順に従ってください。 得られた結果の評価とともに;

得られた結果を比較することにより、有意義に作業します 臨床的特徴患者サンプル;

測定が終了したら、分析装置を完全にすすぎます。

デバイスを長時間停止する場合は、すべての保存手順を実行する必要があります(可能であれば、サービスエンジニアと協力して)。

技術的な問題がある場合は、ライセンスを取得した会社のサービスエンジニアの助けを借りてください。 メンテナンス; 訓練を受けていないスタッフが働くことを信用しないでください。

血液分析装置の作業を開始するときは、分析されたパラメーターの測定の直線性の限界を考慮に入れる必要があります。 分析されたパラメータの値が測定の直線性の限界を超えるサンプルの評価は、誤った結果につながる可能性があります。 ほとんどの場合、過細胞症のサンプルを分析する場合、アナライザーは測定されたパラメーター値の代わりに「D」(希釈)を表示します。これは、サンプルを希釈して再測定する必要があることを示します。 次の2回の希釈で同様の最終結果が得られるまで、希釈を実行する必要があります。

^ 例3つの異なる血液分析装置での高白血球症の患者のサンプルの分析を表に示します。

表3

¦3つの異なる血液分析装置で実行された高白血球症カウント


^ 血液分析装置

サンプル希釈

総価値

^全血

1:1

1:3

1:4

WBC

1

D

274,5

274,5

143,1

715,5

2

322,6

253,2

177,7

141,8

709,0

3

D

D

168,3

139,1

695,5

この表は、全血を分析する場合、1つのアナライザー(2番目)のみが白血球数のデジタル値を示し、他の2つはサンプルを希釈する必要があることを示しています。 その後の3つの希釈でのサンプルの段階的な測定により、1:3および1:4の希釈でのみすべてのデバイスで同様の最終結果を達成することが可能になりました。 したがって、総白血球数は700.0〜710.0 x 10 9 / Lであり、2番目のアナライザーで全血で得られた初期値の2倍以上、1番目と2番目の1:1希釈で1.5倍でした。アナライザー。

  1. ^ 血液分析装置の校正
キャリブレーションとは、結果としてアナライザーをセットアップするための手順を意味します

これは、誤差の系統的成分のゼロバイアス(ゼロバイアス)を達成するか、キャリブレーションエラーを考慮してバイアスがゼロであることを確認します。 血液分析装置の校正は、主に2つの方法で実行できます。

全血;

認定値の安定した血液サンプルに基づいています。

^ 5.1全血キャリブレーション

全血キャリブレーションは、キャリブレーションが検証され、リファレンスとして使用できるリファレンスアナライザーと比較することで実行できます。

参照分析装置との比較による較正には、参照分析装置を備えた研究室の毎日の研究プログラムからランダムに選択された、患者からの静脈血の20サンプルが使用されます。 血液は、K 2EDTA抗凝固剤を含む真空管に収集する必要があります。 リファレンスアナライザーで分析した後、血液チューブは、校正済みデバイスで分析するために検査室に送られます。 リファレンスとキャリブレーションされたアナライザーでの測定間の時間は4時間を超えてはなりません。 キャリブレーション対象の機器でのキャリブレーションサンプルの分析は、患者サンプルの分析と同じ方法で実行する必要があります。 得られた結果は、付録1に示す形式で表に入力されます。これらの結果は、対応するキャリブレーション係数を決定するために使用されます。これは、グラフの原点を通過するキャリブレーションラインの傾き係数に数値的に等しくなります。

キャリブレーション係数は、パッケージに含まれているEXCELプログラムを使用してコンピューター上で計算されます マイクロソフトオフィス任意のバージョン。 このプログラムでキャリブレーション係数を計算するために、散布図が作成されます。ここでは、測定値がX軸に沿ってプロットされ、参照値がY軸に沿ってプロットされ、回帰直線が原点を通るように設定されます。座標。 プログラムは検量線を描き、必要な校正係数であるその傾きを決定します。 重大なエラーが検出された場合(グラフ上でキャリブレーション直線から大幅に離れているポイント)、それらを計算から削除する必要があります(EXCELテーブルの行全体を削除します)。 結果として得られる校正係数は、付録1の表に入力され、操作手順に従ってデバイスの校正を手動で調整するために使用されます。


    1. ^ 認定値の安定化血液サンプルによるキャリブレーション
このキャリブレーション方法は、安定化されたヒト赤血球と、白血球および血小板を模倣する固定されたヒトまたは動物細胞の人工混合物である市販のキャリブレーションおよびコントロール材料に基づいています。 これらの材料の成分の生物学的特性は天然血液とは大きく異なるため、血液学的パラメーターの認定値は特定の種類の分析装置によって異なります。

可能な限り、特定のタイプのアナライザーを校正するためにメーカーが特別に設計した校正器を使用する必要があります。 現代の血液学キャリブレーターで確立された値の不確かさは、一般的にに対応しています 医療要件..。 ただし、すべてのタイプのアナライザーにそのようなキャリブレーターがあるわけではありません。 さらに、保管寿命が限られているため(通常、45日以内)、有効期限が切れていないサンプルを受け取ることが常に可能であるとは限りません。

制御材料は、キャリブレーションの目的でメーカーが意図したものではありません:値の許容範囲ははるかに広く、認定と生産管理の方法は、キャリブレーターほど厳密ではありません。 校正を実行する場合、制御材料は、デバイスの計測特性に関する情報源の1つとしてのみ使用できます。

ただし、キャリブレーションの目的でコントロールマテリアルとキャリブレータの両方を使用する場合、サンプル準備と分析装置の操作の機能が系統誤差の構成要素に大きな影響を与えることに留意する必要があります。 これらの影響要因は、市販の材料で校正する場合には考慮に入れることができません。 結果として、すべての場合において、実行されたキャリブレーションは、患者サンプルで得られた結果の統計(赤血球指数、正常値の間隔)を分析することによって検証する必要があります。

5.2.1血液分析装置の校正の頻度

校正間隔の要件は、通常、分析装置の使用説明書に記載されています。 校正は通常、修理後、またはラボ内の品質管理手順で重大なドリフトが検出された場合に必要です。

5.2.2校正手順

校正手順は、分析装置の取扱説明書に従って実行されます。

5.2.3キャリブレーション結果の確認

この制御は、キャリブレーションを実行した直後にキャリブレーションサンプルを分析することで構成されます。 分析結果が分析値と一致する場合、分析装置の分析変動を考慮して、実行された校正が受け入れられます。

5.2.4赤血球指数を使用したキャリブレーションの検証

キャリブレーションをチェックして改良するこの方法は、赤血球指数の平均値(患者のMCHS、MCH、MCV)の変動がかなり小さいため、キャリブレーション制御とさらなる品質管理に効果的に使用できるという事実を利用しています。 平均化に推奨されるサンプル数は20です。平均MCHSを決定するために任意の患者サンプルを使用できますが、平均MCHおよびMCVを決定するために貧血の患者を除外する必要があります。

最新の血液分析装置の多くには、現在の平均を計算するためのプログラムが組み込まれているため、データ処理が大幅に簡素化されます。

性別に関係なく、18〜60歳の患者からの20サンプルにわたって平均した場合の赤血球指数の目標値を表4に示します。

表4

赤血球指数の目標値

得られた平均値が管理許容範囲外である場合、これはMCVまたはHgbまたはRBCキャリブレーションを修正する必要があることを意味します。

市販のキャリブレーション/コントロール材料を使用した赤血球パラメーターの研究結果に基づいて不十分なキャリブレーションの理由を判断するときは、材料の認証値の信頼性に関する次の評価を考慮に入れる必要があります:

時間の経過とともに最も正確で安定したパラメータは、赤血球の濃度です。

Hgbは安定したパラメーターですが、使用する試薬によって異なります(たとえば、シアン化物またはシアン化物を含まない)。

最も不安定なパラメータはMCVです。 MCV値は、かなり広い範囲の値にわたって、材料の貯蔵寿命全体にわたって変化する傾向があります。 MCVキャリブレーションを改良する場合、平均赤血球指数の分析から得られたデータは、安定化された血液サンプルの認定値よりも優先されます。

RBCキャリブレーションが正しいと仮定すると、表5は次のようになります。 考えられる理由コントロールトレランスのインデックスの平均値の出口。

表5

赤血球指数の平均値を超える理由


赤血球指数

インデックスの平均値

インデックスの平均値

インデックスの平均値

インデックスの平均値

MCHC

国境の下

国境の上

国境の上

国境の下

MCH

許容範囲内

許容範囲内

国境の上

国境の下

MCV

国境の上

国境の下

許容範囲内

許容範囲内

原因

高価なMCV

控えめなMCV

高価なHgb

ヘモグロビンを下げた

ほとんどの場合、生殖管の粘膜からの削りくずがPCRに送られます。この分析は、現在利用可能なすべての性感染症の診断ツールの中で最も正確です。 まれに、血液、尿、唾液、その他の体液のPCRを行う必要があります。

分析手法

特定の試薬の影響下で、分析のために送られる材料中のバクテリアのDNAは何度も増加し、デバイスで識別可能になります。

分析結果の意味

常にPCR 定性分析つまり、答えは「見つかった」または「見つからなかった」だけです。 これらの値の背後にあるものを解読しましょう。 「見つかった」、「陽性」、または単に「+」-対応する細菌のDNAが試験物質から分離され、97%の確率で人がこの感染症に感染していると言えます。 「検出されなかった」、「陰性」、「-」-対応する細菌のDNAが試験物質から分離されなかったため、97%の確率で次のように主張できます。 多数これらの細菌は患者の体内には存在せず、患者がこの感染症に感染していない可能性は60%です。

分析のために送られた物質とともに細菌が試験管に入るには、細菌が人体にある程度含まれている必要があります。 人体に含まれるバクテリアの数が少ないと、ほぼ確実に試験管に侵入せず、検査結果は陰性に戻ります。 しかし、その人はまだ感染していて病気です。 したがって、結果の精度を最大化するには、PCR診断を実行する前に特別な準備が必要です。

高い感度と特異性

PCRは分子診断法であり、多くの感染症の「ゴールドスタンダード」となり、時間の経過とともに臨床的に徹底的にテストされています。

この方法の並外れた感度により、当社の専門家は、遺伝情報に基づいて生物学的物質中の単一の病原体を確実に検出することができます。 ほとんどのウイルスおよび細菌に対するAmpliSensPCRテストシステムの分析感度-生物学的サンプル中の100の微生物の再現性のある検出(1 MLで1000の微生物)

すべてのウイルス感染症、クラミジア感染症、マイコプラズマ感染症、ウレアプラズマ感染症、およびその他のほとんどの細菌感染症に対しても、AmpliSensテクノロジーを使用した場合のPCRの特異性は100%に達します。

のための生物学的材料のコレクション 実験室研究 PCR法による

採血は、使い捨て針(直径0.8〜1.1 mm)を使用して、肘静脈から5 mlの使い捨て注射器または「Venoject」(EDTA付き)などの特殊な真空システムへの空腹時に行われます。 注射器に引き込まれると、そこからの血液は注意深く(泡を形成せずに)抗凝固剤(1:19の比率の6%EDTA溶液または1:の比率の3.8%クエン酸ナトリウム溶液)とともに使い捨てチューブに移されます。 9.ヘパリンは抗凝固剤として使用できません)、チューブをストッパーで閉じ、数回反転させます(抗凝固剤と混合するため)。 血液の入った試験管は、研究まで+ 4°C- + 8°Cの冷蔵庫に保管されます。

最大保管時間:

研究するとき ウイルス性肝炎- 2日

他の感染症を調査する場合-5時間

分析のために、10mlの量の朝の尿の最初の部分は、防腐剤溶液なしで特別なボトルまたは試験管に入れられます。

選択した材料の最大貯蔵寿命は、+ 4°Cの温度の冷蔵庫で1日です。

唾液を採取する前に、生理食塩水で口を3回すすいでください。 唾液は3〜5mlの量で使い捨てチューブに集められます。

材料は、研究の直前に採取するか、すぐに検査室に届ける必要があります。 迅速な配達が不可能な場合、材料は–20°Сで凍結されます。 その後の輸送は凍結して行われます(氷の入った魔法瓶で)。

中咽頭スワブ

材料は、咽頭および扁桃陰窩の後ろから滅菌使い捨てアプリケーターの作業部分によって取られます。 材料を収集した後、アプリケーターは滅菌使い捨てチューブに入れられます。

喀痰および胸水

材料は5-10mlの量で特別なバイアルに入れられます。

材料の最大貯蔵寿命は、+ 4°C- + 8°Cの温度の冷蔵庫で1日です。

生検材料

生検材料は、乾燥した使い捨てエッペンドルフチューブに入れられます。

材料の最大貯蔵寿命は、+ 4°C- + 8°Cの温度の冷蔵庫で1日です。

滑液

材料は使い捨て注射器で1mlの量で採取されます。 収集された材料は、乾燥した使い捨てエッペンドルフチューブに入れられます。

材料の最大貯蔵寿命は、+ 4°C- + 8°Cの温度の冷蔵庫で1日です。

泌尿生殖器感染症の分析のための資料の収集

女性からの資料のサンプリング:

スクレイピングは、次の3つの異なるポイントから実行されます。

子宮頸管

後膣円蓋

必要に応じて、研究用の資料は陰部潰瘍から採取されます(HSV-II、軟性下疳菌の研究)。

フェンスはユニバーサルプローブまたはフォルクマンスプーンで作られています。 ユニバーサルプローブを使用して削り取る場合は、試験材料を含むプローブの作業部分を切断または切断し、保存液を入れた使い捨てのエッペンドルフチューブに入れます。 サンプルをフォルクマンスプーンで採取する場合、機器の作業部分は、使い捨てのエッペンドルフチューブに含まれる防腐剤溶液ですすがれます。

材料の最大貯蔵寿命は、+ 4°C- + 8°Cの温度の冷蔵庫で1日です。

男性からの資料のサンプリング:

スクレイピング(スミア)。

材料は、尿道からのユニバーサルプローブで取得されます。 必要に応じて、研究用の資料は陰部潰瘍から採取されます(HSV-II、軟性下疳菌の研究)。

試験材料を含むプローブの作業部分は、切断または切断され、防腐剤溶液とともに使い捨てのエッペンドルフチューブに入れられます。

材料の最大貯蔵寿命は、+ 4°C- + 8°Cの温度の冷蔵庫で1日です。

前立腺ジュース:

前立腺のマッサージが終了した後、0.5〜1mlの量のジュースが「エッペンドルフ」タイプの使い捨て乾式試験管に集められます。 ジュースが得られない場合は、マッサージの直後に、尿の最初の部分(前立腺ジュースを含む)を10 mlの量で収集します(上記の尿の収集規則を参照してください)。

最大貯蔵寿命は、+ 4°C- + 8°Cの温度の冷蔵庫で1日です。

ELISA(感染)による研究のための生物学的材料(血液)の収集と保管

採血は、使い捨て針(直径0.8〜1.1 mm)を使用して、肘静脈から5 mlの使い捨て注射器または特殊な「Venoject」タイプの真空システム(EDTAありまたはなし)への空腹時に行われます。 注射器に引き込まれると、そこからの血液は慎重に(泡を形成せずに)使い捨ての「乾燥した」試験管または抗凝固剤(1:19または3.8%の比率の6%EDTA溶液)を含む試験管に移されます。 1:9の比率のクエン酸ナトリウム溶液。

+ 4°C- + 8°Cの温度での血清の最大貯蔵寿命は48時間です

-20°Cの温度での血清の最大貯蔵寿命は長期保存です。

梅毒の研究(梅毒RPR、梅毒TPHA、梅毒TPHA(半定量分析)、ELISAによる血清中のホルモン、腫瘍マーカー、自己抗体の濃度の測定、および生化学的研究)のための生物学的物質(血液)の収集と保管

採血が行われます:

空腹時の朝(動的観察-常に同じ時間);

「ドライ」試験管または抗凝固剤を含まない特別な市販の真空システムでのみ。

血液は、使い捨ての針(直径0.8〜1.1 mm)を使用して肘静脈から空腹時に5 mlの乾燥試験管または特別な「Venoject」真空システム(抗凝固剤なし)に採取されます。 溶血のリスクがあるため、注射器での吸引は望ましくありません。

採血当日に血液を検査室に届ける必要があります。 試験前に、血液の入った試験管を+ 4°C- + 8°Cの冷蔵庫に保管します。

+ 4°C- + 8°Cの温度での血清の最大貯蔵寿命は48時間です。

-20°Cの温度での血清の最大貯蔵寿命は長期保存です。

ホエイの解凍は1回のみ許可されています。

リンパ球と好中球の亜集団と機能的活動を決定するための採血

採血が行われます:

朝、空腹時に(5mlの血液)。

凝固を防ぐために、採血中に抗凝固剤が血液に追加されます。血液1mlあたり20単位のヘパリンです。 標準のヘパリンチューブ(VAKUTAINERna-ヘパリンまたはBectonDickinsonの緑色のキャップが付いたLi-ヘパリン5〜7 ml)を使用することをお勧めします。

採血する前に、ヘパリンをチューブの壁に沿って均等に分配します。

注射器で服用する場合は、溶血を防ぐために、圧力をかけずに血液を試験管にスムーズに排出してください。

採取後、サンプルチューブを数回反転させます。 シェーカーを振ったり、ひねったりしないでください。

血液は室温で48時間以内に保存する必要があります

輸送中、血液温度は+ 18°С-+ 24°Сでなければなりません

血清中の免疫グロブリンとCECの測定には、

採血は乾いた試験管でのみ行われます!!!

集荷と輸送の条件は同じです。

AB0システムとRh因子に従って血液型を決定するための生体物質(血液)の収集と保管

採血は、使い捨て針(直径0.8〜1.1 mm)を使用して、肘静脈から5 mlの使い捨て注射器または「Venoject」(EDTA付き)などの特殊な真空システムへの空腹時に行われます。 注射器に引き込まれると、そこからの血液は注意深く(泡を形成せずに)抗凝固剤(1:19の比率の6%EDTA溶液または1:の比率の3.8%クエン酸ナトリウム溶液)とともに使い捨てチューブに移されます。 9)。

採血当日に血液を検査室に届ける必要があります。 試験前に、血液の入った試験管を+ 4°C- + 8°Cの冷蔵庫に保管します。

17-KSの毎日の排泄を測定するための生物学的物質(尿)の収集と保管

朝の尿は捨てられ、翌日の朝の部分を含む次の尿は別のボウルに集められます。 集められた尿の量は混合され、測定されます(!)。 50mlの尿を瓶に注ぎます。

尿量を示すサンプルの配達-同じ日に。

より長い保管(1日以上)の場合、凍結が必要です。

細菌学的研究のための試験材料の収集

泌尿生殖器を分離します。

研究のために患者を準備し、資料をとるための規則:

女性の研究資料は、月経前または月経終了後1〜2日で服用する必要があります。 材料を服用する前に、3〜4時間の排尿や性交を控えることをお勧めします。

診察に出頭した当日の女性は、外性器のトイレを洗ったり、トイレに行ったりしてはいけません。

研究中の材料は、特別な使い捨てプローブ、フォルクマンスプーン、細菌学的ループ、または平滑末端のある耳プローブを使用して採取されます。

材料を服用する5〜7日前に、化学療法と医療処置の服用を中止する必要があります。

試験材料には血液不純物が含まれていてはなりません。

泌尿生殖器の緩慢で慢性的な感染症の場合は、次のいずれかの挑発方法を使用することをお勧めします。

生物学的:ゴノバシン(5億の微生物体)を成人に1回、筋肉内投与し、3歳以上の子供に1億から2億の微生物体を投与します。 ゴノバシンの導入は、3歳未満の子供にはお勧めできません。

熱:30.40.50分間の電極の腹部-膣-仙骨の配置または10.15.20分間の誘導熱による3日間のジアテルミーの適用。 尿道、子宮頸管、および直腸からの排出は、各ウォーミングアップの1時間後に行う必要があります。

機械的:女性の子宮頸部に金属製のキャップを4時間押し付け、男性の尿道をブゲに10分間マッサージします。

消化:研究の24時間前に塩辛い食べ物とアルコールを摂取する。

化学的挑発は、一部の病原体に有害な影響を与えるため、実行しないでください。

資料は、挑発後および24〜48〜72時間後に取得されます。

病理学的プロセスの感染性の疑いがある場合、材料のサンプリングは産婦人科医によって行われます。

子宮頸管、虫歯、子宮付属器の内容物は通常無菌です。

尿道

材料を採取する前に、尿道の外部開口部を滅菌生理食塩水に浸した綿棒で処理する必要があります。

化膿性分泌物がある場合は、排尿直後または排尿後15〜20分で掻き取ります。分泌物がない場合は、尿道をプローブでマッサージして物質を採取します。

女性の場合、尿道にプローブを導入する前に、恥骨結合の周りでプローブをマッサージする必要があります。

プローブを女性の尿道に1〜1.5 cmの深さまで挿入し、男性は3〜4 cmの深さまで挿入し、いくつかの回転運動を行います。 子供の場合、材料は尿道の外部開口部からのみ採取されます。

外陰部、膣弁。 排出は、滅菌綿棒で行われます。 バルトリン腺の炎症の場合、それらの穿刺が行われ、腺の膿瘍が開かれたときに、内容物は滅菌綿棒で採取されます。

膣。 研究用の材料は、後部円蓋または粘膜の病理学的に変化した領域から滅菌綿棒で採取されます。 手作業による検査の前に、播種材料を採取する必要があります。

教会チャンネル。

材料を取る前に、綿棒で粘液を取り除き、子宮頸部を滅菌生理食塩水で処理する必要があります。

コルポスコープを使用する必要があります。

プローブを子宮頸管に0.5〜1.5cmの深さまで挿入します。

子宮頸管の侵食が存在する場合は、それらを滅菌生理食塩水で処理する必要があり、材料は健康で変化した組織の境界から採取する必要があります。

プローブを取り外すときは、膣の壁に触れることを完全に排除する必要があります。

播種には、子宮頸管壁の診断掻爬中に得られた粘膜の掻爬を使用することができます。

子宮材料は、プローブにコーティングが施されたシリンジアスピレーターなどの特殊な器具を使用して採取されます。

子宮サプリメント

子宮付属器の炎症過程の場合、感染の焦点からの物質(膿、滲出液、臓器片)は、手術中または小さな骨盤の診断的穿刺中に、膣円蓋を通して採取されます。

輸送環境での研究のために採取された材料は、+ 4°Cで最大24時間保管できます。サンプルの凍結は許可されていません。

尿

尿の微生物学的検査は、開始する前に実施する必要があります 抗菌療法..。 尿 健康な人無菌。

朝、外性器を徹底的にトイレに入れた後、自由に放出された尿の平均部分である3〜5mlを無菌容器に集めます。 前立腺炎が疑われる場合は、4つのサンプルが取得されます。尿の3つの部分(自然排尿中の最初と中間の部分、および前立腺のマッサージ後の最後の5〜10分)とマッサージ中の前立腺分泌物です。

カテーテルで尿を採取することは、尿路感染症のリスクを伴うため、避ける必要があります。 カテーテル挿入は、患者が排尿または分化できない場合に行われます。 炎症過程腎臓と膀胱で。 この目的のために、膀胱を空にし、40mgのネオマイシンと20mgのポリミキシンを含む50mlの溶液を膀胱に注射します。 10分後、尿サンプルが検査のために採取されます。 プロセスが膀胱に限局している場合、尿は無菌のままです。 腎臓が感染すると、細菌尿が認められます。

患者の尿は恥骨上部の穿刺によって得ることができます 膀胱..。 この採尿方法は、最も信頼できる結果をもたらします。

尿の微生物学的検査は、患者から受け取った後、できるだけ早く実施する必要があります。 尿に含まれる微生物は室温で急速に増殖し、細菌汚染の程度を決定する際に誤った結果をもたらす可能性があります。 この点に関して、細菌尿の程度について尿を検査する場合、尿サンプルを採取した瞬間から実験室での研究の開始まで、1〜2時間以内に経過する必要があります。

泌尿生殖器感染症の原因物質の存在について尿を検査する場合、サンプルは+ 4°Cで最大18時間保存できます。

尿サンプルを輸送するときは、周囲温度を考慮してください。

腸内毒素症

腸内毒素症の材料(便)は、抗菌薬や化学療法薬による治療を開始する前に服用します。

FPKおよびPCのコースを備えた臨床検査診断部門

通信講座の第6コースの学生による冬の臨床検査セッションでの教室テストの実行の準備のための規律臨床検査診断のセクションのリスト。

1.臨床診断研究所の組織構造。

2.一般的な臨床検査研究。

3.血液学的検査。

4.止血を評価するための実験方法。

5.生化学的実験室試験。

6.実験室試験の品質管理。

通信コースの第6コースの学生による冬の実験室試験セッションでの教室テストの実行の準備のための規律臨床検査診断のためのテスト質問のリスト。

    臨床診断研究所の構造組織。

    臨床診断研究所の業務を規制する、ベラルーシ共和国保健省の規範的文書および命令。

    臨床診断実験装置。

    臨床診断研究所の主な測定および分析装置。

    臨床診断検査室で働くときの安全性と衛生および疫学的規則の基本。

    生物学的材料の受け取り、配達、受け取り、登録、登録に関する規則。

    一般的な臨床検査。

    検査、収集、保管、および材料の処理のための患者の準備 一般的な分析尿。

    尿の物理的性質:色、透明度、臭い、pH、尿の相対密度。

    尿の化学的性質、総タンパク質を測定する方法(定性的および定量的方法、「乾式化学」の方法)。

    指示紙とグルコースオキシダーゼ法を用いた尿中グルコースの測定。

    尿沈澱物の天然調製物の調製に関する規則。

    組織化された尿沈殿物の元素の定量化。

    逃亡堆積物の元素の決定。

    組織化されていない降水の種類。

    血液の一般的な臨床分析。

    ESR、ヘモグロビン濃度、赤血球数のカウント、 カラーインデックス、白血球および白血球の式。

    血液の一般的な臨床分析のための患者の準備、材料の収集、保管、および処理に関する規則。

    末梢血の赤血球と白血球のレベルの正常値と生理学的変動の限界。

    薬の準備とゴリヤエフチャンバーでのカウントのルール。

    ヘモグロビンシアニド法による血中ヘモグロビンの測定方法。

    骨髄造血の現代的な理解。

    末梢血中の白血球の割合。 白血球処方の診断的価値。

    血液凝固系を特徴付ける臨床検査。

    血液凝固システムの概念。

    一次止血。 一次止血の研究のための実験方法。

    凝固止血の段階。

    線維素溶解。

    抗凝固システム。

    二次止血を評価するための実験方法。

    血液生化学的パラメータを特徴付ける臨床検査。

    タンパク質代謝を特徴付ける実験室指標。 ビウレット法による血清中の総タンパク質の測定。

    残留窒素とその成分。 尿素、クレアチニン、尿酸の測定方法。

    酵素の研究方法。 酵素活性測定の臨床的および診断的価値。

    炭水化物の生物学的役割。 酵素法によるグルコース含有量の決定。

    血漿リポタンパク質。 脂質代謝の実験室指標。

    胆汁色素の形成と代謝。 色素代謝の指標の研究の臨床的および診断的価値。

    臨床検査研究の分析の信頼性と品質管理。

    検査結果の分析的評価。 エラーの種類、その特性。

    内部の実験室の品質管理。 研究結果の再現性を監視するための方法。 研究結果の正確さの管理。

C分析ラボレポートを残します。

分析ラボの結論は、状況に応じたタスクの条件に従って作成されます。

提案された検査データの分析に基づいて、次の質問に答える必要があります。

分析された方法の根底にある原理。

必要な機器;

調査中の資料を準備するための規則と、この方法を実行するときに発生する可能性のあるエラーの主な原因。

単位;

参照値の概念。 分析された方法の臨床的および診断的価値。

実践的なスキル:

実験室研究のための職場の組織;

必要な濃度の試薬の調製;

生物学的材料の受け取り、ラベル付け、保管。

一般的な血液検査を行う;

一般的な尿検査の実施;

血液統計学的研究の実施;

生化学的研究;

実験室研究結果の登録;