نتائج اختبار كومبس. تفاعل كومبس غير المباشر (اختبار مضاد الغلوبولين ، الكشف عن الأجسام المضادة غير الكاملة لكريات الدم الحمراء) ، الدم. الكشف عن الأجسام المضادة IgG في اختبار كومبس

على سطح كريات الدم الحمراء عدد كبير منالمستضدات. اعتمادًا على نوع هذه المستضدات ، يتم تمييز مجموعات الدم ، وأكثر المجموعات التي تمت دراستها هي ABO و Rh و Kell و Duffy وغيرها الكثير ...

متوسط ​​السعر في منطقتك: 2645 من 2645 ... إلى 2645

1 تقوم المعامل بهذا التحليل في منطقتك

وصف الدراسة

التحضير للبحث:يؤخذ الدم من الوريد ، ثم يتم الحصول على المصل (بلازما الدم بدون الفيبرينوجين) عن طريق التخثر الطبيعي أو عن طريق ترسيب الفيبرينوجين. المواد الدراسية:أخذ الدم

يوجد عدد كبير من المستضدات على سطح كريات الدم الحمراء. اعتمادًا على نوع هذه المستضدات ، يتم تمييز مجموعات الدم ، وأكثر المجموعات التي تمت دراستها هي ABO و Rh و Kell و Duffy والعديد من الأنظمة الأخرى. عادة ، توجد الأجسام المضادة لمستضدات مجموعة أخرى في الدم ، ولكن أثناء نقل الدم ، والحمل ، وأمراض المناعة الذاتية ، وما إلى ذلك ، يتم العثور على الأجسام المضادة لمستضداتها.

طريقة

يعتمد تفاعل كومبس غير المباشر على اكتشاف تراص (التصاق) كريات الدم الحمراء ، التي تحتوي على أجسام مضادة غير مكتملة على السطح ، والتي تظهر عند إضافة مصل مضاد الجلوبيولين.

في المرحلة الأولى ، يتم إدخال مجموعة كريات الدم الحمراء المانحة (O (I) ، Rh +) ومصل الاختبار في أنبوب واحد. إذا كانت الأجسام المضادة غير المكتملة لكريات الدم الحمراء موجودة في مصل الدم المدروس ، فعندئذ يتم تثبيتها على سطح كريات الدم الحمراء المانحة.

في المرحلة الثانية ، يتم وضع كريات الدم الحمراء المانحة مع الأجسام المضادة (إن وجدت) ومصل مضاد الجلوبيولين القياسي مع الأجسام المضادة للجلوبيولين المناعي البشري على الزجاج. إذا تم تثبيت الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في المرحلة الأولى على سطح كريات الدم الحمراء ، فعند إضافة المصل القياسي ، تلتصق كريات الدم الحمراء معًا بسبب تفاعل الأجسام المضادة.

القيم المرجعية - القاعدة
(تفاعل كومبس غير المباشر (اختبار مضاد الغلوبولين ، الكشف عن الأجسام المضادة غير الكاملة لكريات الدم الحمراء) ، الدم)

قد تختلف المعلومات المتعلقة بالقيم المرجعية للمؤشرات ، فضلاً عن تكوين المؤشرات المدرجة في التحليل ، اختلافًا طفيفًا اعتمادًا على المختبر!

معيار:

عادة ، لا ينبغي أن يكون هناك أجسام مضادة لكريات الدم الحمراء ؛ عندما يتم إجراء تفاعل كومبس ، لا يحدث تجمع للكريات الحمراء.

دواعي الإستعمال

دراسة المناعة الخلطية النوعية في حالة الاشتباه في وجود تفاعلات مناعية ذاتية في الجسم ، وتعارض عامل ريسس بين الأم والجنين ، وتحديد توافق دم المتبرع والمتلقي

زيادة القيم (نتيجة إيجابية)

يتم الكشف عن الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء عندما:

1. فقر الدم الانحلالي للمناعة الذاتية

2. مرض انحلالي حديثي الولادة

3. أمراض جهازيةالنسيج الضام

4. التهاب الكبد المزمن النشط ، إلخ.

- دراسة تساعد على تحديد محتوى الأجسام المضادة غير الكاملة لكريات الدم الحمراء في الدم. يكتشف اختبار مضاد الغلوبولين هذا الأجسام المضادة في النساء الحوامل.

بالإضافة إلى ذلك ، يسمح لـ المراحل الأوليةلتشخيص فقر الدم الانحلالي عند الأطفال حديثي الولادة الذين يعانون من تضارب عامل ريسس. هذا يساعد على منع تدمير خلايا الدم الحمراء الضرورية لتكوين الدم الطبيعي. تم إنشاء هذا الاختبار في عام 1945 بواسطة روبرت كومبس ، ولهذا السبب حصل على اسمه.

اختبار كومبس هو دراسة متعددة الاستخدامات تسمح بالتشخيص في الوقت المناسب لاضطرابات تكون الدم في كل من البالغين والأطفال.

هناك الأنواع التالية من هذه الاختبارات:

1. اختبار كومبس المباشر- يسمح لك بتحديد الأجسام المضادة الموجودة على سطح كريات الدم الحمراء. عادة ، يتم وصف مثل هذه الدراسة للاشتباه في انحلال الدم وفقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي وأمراض المناعة الذاتية الأخرى. بالإضافة إلى ذلك ، يتم عقده بعد علاج بالعقاقيرالأدوية القائمة على الكينين أو البنسلين أو ميثيل دوبا ، أو بعد نقل الدم. للحصول على نتائج أكثر دقة ، قبل الدراسة ، يجب عليك التوقف تمامًا عن تناول الأدوية قبل أسبوع واحد على الأقل.
2. اختبار كومبس غير المباشر- اختبار يمكن أن يكشف عن الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في البلازما. يتم إجراؤه عادةً أثناء الحمل وقبل نقل الدم. تظهر الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في دم الشخص أثناء العمل التفاعلي لجهاز المناعة أو كرد فعل لبعض الأدوية... للحصول على دراسة أكثر دقة ، يتم تنفيذ العديد من الأسوار في وقت واحد بفاصل 2 ساعة.

مؤشرات ل

يتم إجراء اختبار كومبس فقط إذا كان هناك مؤشر خطير. هذه دراسة مكلفة وتستغرق وقتا طويلا وهي اختبار محدد.

عادة ، تعتبر الحالات التالية مؤشرات لتنفيذه:

1. مع نقل الدم... يسمح لك الاختبار بتحديد ما إذا كان دم المتلقي سيتجذر في جسم الإنسان ، وكذلك تحديد ما إذا كان التبرع ممكنًا. في هذه الحالة ، من الضروري فحص المواد الخاصة بكل من المتبرع والمتلقي. من المهم تحديد طبيعة الأجسام المضادة ، لأنه في حالة عدم توافقها في الجسم على خلفية تضارب Rh ، يتم تدميرها الجهاز المناعي... وهذا يؤدي إلى ظهور أمراض خطيرة ، وفي حالات نادرة ، حتى الموت.
2. أمام التدخلات الجراحيةعندما يكون هناك خطر فقدان الدم... يتم ذلك حتى يتمكن الطبيب من حقن الدم المناسب على الفور لاستعادة الجسم.
3. لتحديد حساسية العامل الريصي.الريسوس هو مستضد محدد يحدث في جسم كل امرأة أثناء الحمل. إذا كانت الأم موجبة ، وكان الأب سلبيًا ، أو العكس ، فلا تبعية للطفل - يمكنه أن يرث أي شخص. إذا تلقى الطفل الريسوس المعاكس للأم ، فإن خطر التحسس مرتفع. وتتميز هذه الظاهرة باختلاط دم الأم والطفل. يمكن أن يحدث هذا أثناء الحمل وأثناء عملية الولادة.

إذا نشأ تضارب عامل ريسس في جسد المرأة الحامل ، تبدأ مناعة الأم في إدراك جنينها على أنه جسم غريب... لهذا السبب ، هناك خطر كبير من أنه سيبدأ في مهاجمته.

نتيجة لمثل هذه الإجراءات ، قد يصاب الطفل بأمراض خطيرة. في أغلب الأحيان ، يحدث داء الكريات الحمر - وهي ظاهرة لا يستطيع فيها جسم الطفل إنتاج عدد كافٍ من خلايا الدم الحمراء.

بالإضافة إلى ذلك ، بسبب تضارب العامل الريصي ، يمكن أن تحدث وفاة الجنين في الرحم أو بعد الولادة مباشرة. في النهج الصحيحلعلاج مثل هذه العواقب الوخيمة يمكن تجنبها بسهولة.

الانحرافات عن القاعدة

إذا كانت النتيجة إيجابية لرد فعل كومبس ، يستنتج الطبيب أن هناك أجسامًا مضادة لخلايا الدم الحمراء في مصل الدم. هذا يشير إلى أن دم المتبرع لا يمكن أن يكون متوافقًا مع دم المريض.

إذا تم تشخيص نتيجة إيجابية في جسم المرأة الحامل مع دم سلبي ، فإن جسمها يحتوي على أجسام مضادة لدم الجنين.

هذا يتحدث عن صراع Rh ، والذي يتطلب نهجًا دقيقًا للغاية لإدارة الحمل من جانب الطبيب ، وكذلك تنفيذ جميع التعليمات والتوصيات من المرأة.

إذا كانت الأجسام المضادة موجودة في دم الطفل ، يتم تشخيص مرض الانحلالي عند الوليد. في هذه الحالة ، يتم إجراء دراسة ثانية لتحديد ما إذا كانت هناك زيادة في سترات الأجسام المضادة في دم الأم الحامل أم لا.

المضاعفات المحتملة من اختبار كومبس

اختبار كومبس هو اختبار آمن إلى حد ما يسمح لك بتشخيص عدد من أمراض المناعة الذاتية في المراحل الأولية. نادرًا ما يسبب مضاعفات عواقب سلبيةالمرتبطة بأخذ عينات الدم.

تتكون في:

• نزيف أو نزيف تحت الجلد
• دوار وإغماء
• التلوث المعدي

7 295

تفاعل كومبس

تفاعل كومبس- اختبار مضاد الجلوبيولين لتحديد الأجسام المضادة غير الكاملة لكريات الدم الحمراء. يستخدم اختبار كومبس لاكتشاف الأجسام المضادة لعامل Rh في النساء الحوامل ولتحديد فقر الدم الانحلالي عند الأطفال حديثي الولادة الذين يعانون من عدم توافق عامل Rh ، مما يؤدي إلى تدمير خلايا الدم الحمراء. تم اقتراح هذه الطريقة من قبل الطبيب الإنجليزي روبرت كومبس في عام 1945 ، والتي سميت فيما بعد بـ "تفاعل كومبس".

تفاعل كومبس المباشر

يمكن أن تكون الأجسام المضادة الموجودة على سطح كريات الدم الحمراء ثابتة أو حرة في بلازما الدم. اعتمادًا على حالة الأجسام المضادة ، يتم إجراء تفاعل كومبس المباشر أو غير المباشر. إذا كان هناك سبب للاعتقاد بأن الأجسام المضادة مثبتة على سطح خلايا الدم الحمراء ، يتم إجراء اختبار كومبس المباشر. في هذه الحالة ، يتم إجراء الاختبار في مرحلة واحدة - يتم إضافة مصل مضاد الجلوبيولين. في حالة وجود أجسام مضادة غير مكتملة على سطح خلايا الدم الحمراء ، يحدث تراص خلايا الدم الحمراء.

رد فعل غير مباشر

يستمر تفاعل كومبس غير المباشر على مرحلتين. أولاً ، من الضروري إجراء توعية مصطنعة لخلايا الدم الحمراء. لهذا ، يتم تحضين كريات الدم الحمراء ومصل الدم قيد الدراسة ، مما يتسبب في تثبيت الأجسام المضادة على سطح كريات الدم الحمراء. بعد ذلك ، يتم إجراء المرحلة الثانية من اختبار كومبس - إضافة مصل مضاد الجلوبيولين.

ملاحظاتتصحيح

مؤسسة ويكيميديا. 2010.

شاهد ما هو رد فعل كومبس في القواميس الأخرى:

رد فعل القنب- (اختبار كومبس) طريقة لتحديد الأجسام المضادة ريسوس على سطح كريات الدم الحمراء ، والتي تسبب ترسب الجلوبيولين في مصل الدم. يستخدم هذا الاختبار للتشخيص فقر الدم الانحلاليعند الرضع الذين يعانون من عدم توافق العامل الريصي والذين لديهم ... ... قاموسفي الطب

طريقة لتحديد الأجسام المضادة للريسوس على سطح كريات الدم الحمراء والتي تسبب ترسب الجلوبيولين في مصل الدم. يستخدم هذا الاختبار لتشخيص فقر الدم الانحلالي عند الرضع الذين يعانون من عدم توافق العامل الريصي والذين لديهم ... ... المصطلحات الطبية

- (اختبار مضاد الجلوبيولين) طريقة للكشف عن الأجسام المضادة غير الكاملة المرتبطة بشكل طبيعي أو اصطناعي بالخلايا (عادة مع كريات الدم الحمراء) باستخدام مضاد الجلوبيولين مع ki (A. c.). يتضمن A. s. ، تعجيل Ab غير المكتمل ، الناقلات في هذه العملية ، ... ... قاموس علم الأحياء الدقيقة

رد فعل KUMBSA- (سميت على اسم عالم المناعة البريطاني آر آر أي كومبس ، المولود في عام 1921 ، مرادف - اختبار مضاد الجلوبيولين) - تفاعل مصلي يعتمد على تراص كريات الدم الحمراء مع الأجسام المضادة الذاتية والمتساوية غير المكتملة في وجود مصل مضاد للجلوبيولين. في… … القاموس الموسوعي لعلم النفس والتربية

رد الفعل الانحلالي- عسل. تفاعل انحلالي لنقل الدم (TGR) انحلال الدم في كريات الدم الحمراء لمتلقي أو متبرع (نادرًا) يحدث أثناء نقل الدم ومكوناته. يمكن أن تكون ردود الفعل ذات طبيعة مناعية أو غير مناعية. المسببات المرضية والتفاعلات المناعية ... ... كتيب المرض

- (R.R.A Coombs ، مواليد 1921 ، اختصاصي المناعة الإنجليزي) تفاعل مصلي قائم على تراص كريات الدم الحمراء بأجسام مضادة ذاتية ومتساوية غير مكتملة في وجود مصل مضاد للجلوبيولين ؛ يستخدم في طب نقل الدم والطب الشرعي وكذلك ... ... قاموس طبي شامل

رد فعل KUMBSA- تفاعل كومبس ، وهو تفاعل مصلي يسمح باكتشاف الأجسام المضادة غير الكاملة المثبتة على سطح خلايا الدم الحمراء أو الموجودة في بلازما الدم. ك. ص. بناءً على استخدام مصل مضاد الجلوبيولين الذي تم الحصول عليه عن طريق فرط المناعة ... القاموس الموسوعي البيطري

رد فعل KUMBSA- يستخدم للكشف عن الأجسام المضادة أحادية التكافؤ أو ما يسمى بالأجسام المضادة غير المكتملة ، وخاصة لتحليل مجموعات دم الخنازير وبعض الحيوانات الأخرى ... المصطلحات والتعاريف المستخدمة في التربية وعلم الوراثة وتكاثر حيوانات المزرعة

انظر رد فعل كومبس. (

اختبار التراص لتحديد الأجسام المضادة لمضادات الريسوس ( رد فعل غير مباشركومبس)يتقدمفي المرضى الذين يعانون من انحلال الدم داخل الأوعية الدموية. في بعض هؤلاء المرضى ، تم العثور على أضداد ريسوس غير مكتملة ، أحادية التكافؤ. تتفاعل على وجه التحديد مع كريات الدم الحمراء إيجابية العامل الريصي ، ولكنها لا تسبب تراصها. يتم تحديد وجود مثل هذه الأجسام المضادة غير المكتملة من خلال اختبار كومبس غير المباشر. للقيام بذلك ، يضاف مصل مضاد الغلوبولين (الأجسام المضادة ضد الغلوبولين المناعي البشري) إلى نظام الأجسام المضادة للريسوس + كريات الدم الحمراء إيجابية العامل الريصي ، والتي تسبب تراص كريات الدم الحمراء. باستخدام تفاعل كومبس ، يتم تشخيص الحالات المرضية المرتبطة بالتحلل داخل الأوعية الدموية لكريات الدم الحمراء ذات الأصل المناعي ، على سبيل المثال ، مرض الانحلالي عند الأطفال حديثي الولادة: تتحد كريات الدم الحمراء للجنين الموجب للعامل الريصي مع الأجسام المضادة غير المكتملة لعامل الريزوس المنتشر في الدم ، عبرت المشيمة من أم سلبية عامل ريسس.

آلية... ترجع صعوبة اكتشاف الأجسام المضادة غير الكاملة (أحادية التكافؤ) إلى حقيقة أن هذه الأجسام المضادة ، المرتبطة بحلقات مستضد معين ، لا تشكل بنية شبكية ولا يتم اكتشاف التفاعل بين المستضدات والأجسام المضادة عن طريق التراص أو الترسيب أو غيرهما الاختبارات. لتحديد معقدات الجسم المضاد المستضد المتكونة ، يجب استخدام أنظمة اختبار إضافية. للكشف عن الأجسام المضادة غير المكتملة ، على سبيل المثال ، إلى مستضد Rh لخلايا الدم الحمراء في مصل دم المرأة الحامل ، يتم إجراء التفاعل على مرحلتين: 1) يتم إضافة خلايا الدم الحمراء المحتوية على مستضد Rh إلى التخفيفات المزدوجة من اختبار المصل وحفظه عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة ؛ 2) يضاف مصل الأرانب المضاد للجلوبيولين البشري (في تخفيف عمل معاير سابقًا) إلى كريات الدم الحمراء التي يتم غسلها جيدًا بعد المرحلة الأولى. بعد الحضانة لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية ، يتم تقييم النتائج من خلال وجود التراص الدموي (تفاعل إيجابي). من الضروري التحكم في مكونات التفاعل: 1) مصل مضاد للجلوبيولين + حساس بشكل واضح بواسطة كريات الدم الحمراء لأجسام مضادة محددة ؛ 2) خلايا الدم الحمراء المعالجة بمصل طبيعي + مصل مضاد للجلوبيولين. 3) كريات الدم الحمراء سلبية العامل الريصي تعامل بالمصل المدروس + مصل مضاد الجلوبيولين.

50. تفاعل التراص الدموي السلبي. آلية. عناصر. طلب.

تفاعل التراص الدموي غير المباشر (السلبي)(RNGA ، RPGA)يعتمد على استخدام كريات الدم الحمراء (أو اللاتكس) مع المستضدات أو الأجسام المضادة الممتصة على سطحها ، والتي يؤدي تفاعلها مع الأجسام المضادة أو المستضدات المقابلة لمصل الدم لدى المرضى إلى التصاق وتساقط كريات الدم الحمراء في قاع أنبوب الاختبار أو خلية على شكل رواسب صدفي.

عناصر.لإنتاج RNGA ، يمكن استخدام كريات الدم الحمراء في الكبش ، والحصان ، والأرانب ، والدجاج ، والفأر ، والإنسان وغيرها ، والتي يتم حصادها للاستخدام المستقبلي ، ومعالجتها بالفورمالين أو الجلوتارالدهيد. تزداد قدرة امتصاص كريات الدم الحمراء عند معالجتها بمحلول التانين أو كلوريد الكروم.

يمكن أن تكون المستضدات الموجودة في RNGA عبارة عن مستضدات عديد السكاريد للكائنات الحية الدقيقة ، ومستخلصات اللقاحات البكتيرية ، ومستضدات الفيروسات والريكتسيا ، بالإضافة إلى مواد أخرى.

تسمى كريات الدم الحمراء المحسوسة بارتفاع ضغط الدم بتشخيص كرات الدم الحمراء. لتحضير تشخيص الكريات الحمراء ، غالبًا ما تستخدم كريات الدم الحمراء في الأغنام ، والتي لها نشاط امتصاص عالي.

طلب... يستخدم RNGA لتشخيص الأمراض المعدية ، لتحديد هرمون موجهة الغدد التناسلية في البول عند حدوث الحمل ، للكشف عن فرط الحساسية للأدوية والهرمونات ، وفي بعض الحالات الأخرى.

آلية... يتميز اختبار التراص الدموي غير المباشر (IRH) بحساسية وخصوصية أعلى بكثير من اختبار التراص. يتم استخدامه لتحديد العامل الممرض من خلال تركيبه المستضدي أو للإشارة إلى المنتجات البكتيرية - السموم في المادة المرضية المدروسة وتحديدها. وفقًا لذلك ، يتم استخدام تشخيصات الأجسام المضادة القياسية (التجارية) ، والتي يتم الحصول عليها عن طريق امتصاص أجسام مضادة معينة على سطح كريات الدم الحمراء المعالجة بالتانين (المعالجة بالتانين). يتم تحضير التخفيفات التسلسلية لمواد الاختبار في آبار الألواح البلاستيكية. ثم يتم إضافة نفس الحجم من معلق بنسبة 3٪ من كريات الدم الحمراء المحملة بالأجسام المضادة إلى كل بئر. إذا لزم الأمر ، يتم وضع التفاعل بالتوازي في عدة صفوف من الآبار مع كريات الدم الحمراء محملة بأجسام مضادة من نوعية مجموعة مختلفة.

بعد ساعتين من الحضانة عند 37 درجة مئوية ، ضع في الاعتبار النتائج وتقييمها مظهر خارجيرواسب كريات الدم الحمراء (بدون اهتزاز): مع تفاعل سلبي ، تظهر الرواسب على شكل قرص مضغوط أو حلقة في قاع البئر ، مع رد فعل إيجابي ، رواسب مزركشة مميزة من كريات الدم الحمراء ، طبقة رقيقة ذات حواف غير متساوية .

الأجسام المضادةيمكن أن تكون موجودة على سطح كريات الدم الحمراء في حالة ثابتة وحرة في بلازما الدم... اعتمادًا على حالة الأجسام المضادة ، يتم إجراء تفاعل كومبس المباشر أو غير المباشر. إذا كان هناك سبب للاعتقاد بأن الأجسام المضادة مثبتة على سطح خلايا الدم الحمراء ، يتم إجراء اختبار كومبس المباشر. في هذه الحالة ، يتم الاختبار في مرحلة واحدة - مصل مضاد الجلوبيولين... في حالة وجود أجسام مضادة غير مكتملة على سطح خلايا الدم الحمراء ، التلصيقكريات الدم الحمراء.

رد فعل غير مباشر

يستمر تفاعل كومبس غير المباشر على مرحلتين. تحتاج أولاً إلى التنفيذ المصطنع توعيةكريات الدم الحمراء. لهذا ، يتم تحضين كريات الدم الحمراء ومصل الدم قيد الدراسة ، مما يتسبب في تثبيت الأجسام المضادة على سطح كريات الدم الحمراء. بعد ذلك ، يتم إجراء المرحلة الثانية من اختبار كومبس - إضافة مصل مضاد الجلوبيولين.

معادلة الترسيب - RP (من lat praecipilo إلى الترسيب) هو تكوين وترسيب مركب من مستضد جزيئي قابل للذوبان مع أجسام مضادة في شكل تعكر ، يسمى ترسب... يتكون عن طريق خلط المستضدات والأجسام المضادة بكميات متساوية ، فائض واحد منهم يقلل من مستوى تكوين المركب المناعي. يتم إجراء تفاعل الترسيب في أنابيب الاختبار (تفاعل الترسيب الدائري) ، في المواد الهلامية ، أو وسائط المغذيات ، وما إلى ذلك. Ouchterloni ، الانتشار المناعي الإشعاعي ، الرحلان الكهربي المناعيوإلخ.

رد فعل حلقة هطول الأمطار... يتم إجراء التفاعل في أنابيب ترسيب ضيقة: يتم وضع مستضد قابل للذوبان على مصل المناعة. مع النسبة المثلى للمستضد والأجسام المضادة ، معتم حلقة مترسبة... إذا تم استخدام مستخلصات الأنسجة المغلية والمفلترة كمستضدات في التفاعل ، عندئذٍ يسمى هذا التفاعل I رد فعل- ترسيب حراري (تفاعل يتم فيه اكتشاف الجمرة الخبيثة).
تفاعل Ouchterloni مزدوج الانتشار المناعي... لإعداد التفاعل ، يُسكب هلام الأجار المذاب في طبقة رقيقة على لوح زجاجي ، وبعد التصلب ، يتم قطع الآبار فيه. يتم وضع المستضدات والأمصال المناعية بشكل منفصل في آبار الهلام ، والتي تنتشر تجاه بعضها البعض. عند نقطة الالتقاء ، وبنسب مكافئة ، فإنها تشكل راسبًا على شكل شريط أبيض. في الأنظمة متعددة المكونات ، تظهر عدة خطوط من الرواسب بين الآبار مع المستضدات والأجسام المضادة ؛ في AGs متطابقة ، تندمج الخطوط المترسبة ؛ في AHs غير المتطابقة ، فإنها تتداخل.
رد فعل الانتشار المناعي الشعاعي.يسكب مصل المناعة مع هلام الأجار المنصهر بالتساوي على الزجاج. بعد التصلب ، يتم عمل الآبار في الجل ، حيث يتم وضع المستضد في تخفيفات مختلفة. ينتشر المستضد في الهلام ، ويشكل مناطق ترسيب دائرية بها أجسام مضادة حول الآبار. يتناسب قطر حلقة الترسيب مع تركيز المستضد. يتم استخدام التفاعل لتحديد الغلوبولين المناعي في الدم من مختلف الفئات ، ومكونات النظام التكميلي ، إلخ.
الرحلان المناعي- مزيج من طريقة الرحلان الكهربي والترسيب المناعي: يتم إدخال خليط من المستضدات في آبار الجل ويفصل في الهلام باستخدام الرحلان الكهربي ، ثم يتم إدخال مصل مناعي في الأخدود الموازي لمناطق الرحلان الكهربي ، والتي تكون الأجسام المضادة لها ينتشر في الهلام ويشكل عند "الاجتماع" مع مولد الضد لخط الترسيب.
تفاعل التلبد(وفقًا لرامون) (من اللاتينية f1oecus - رقائق الصوف) - ظهور بريق أو كتلة ندفية (ترسيب مناعي) في أنبوب اختبار أثناء تفاعل السموم - مضاد السموم أو التوكسيد - مضاد السموم. يتم استخدامه لتحديد نشاط المصل المضاد للسموم أو الذيفانات.

كتابة HLA- دراسة معقد التوافق النسيجي البشري الرئيسي - مركب HLA. يتضمن هذا التكوين منطقة من الجينات الموجودة على الكروموسوم 6 تقوم بتشفير مستضدات HLA المشاركة في الاستجابات المناعية المختلفة.

مهام لـ كتابة HLAيمكن أن يكون مختلفًا تمامًا - التعريف البيولوجي (نوع HLA موروث جنبًا إلى جنب مع الجينات الأبوية) ، وتحديد الاستعداد ل امراض عديدة، واختيار المتبرعين لزرع الأعضاء - في نفس الوقت ، تتم مقارنة نتائج نوع HLA لأنسجة المتبرع والمتلقي. بمساعدة كتابة HLA ، يتم تحديد كيفية تشابه الزوجين أو تمييزهما عن طريق مستضدات توافق الأنسجة من أجل تشخيص حالات العقم.

تفترض كتابة HLA تحليل تعدد الأشكال HLAويتم تنفيذه بطريقتين - وراثية مصلية وجزيئية. تعتمد الطريقة المصلية الكلاسيكية لنوع HLA على اختبار السمية الميكروية ، بينما تستخدم الطريقة الجزيئية PCR (تفاعل البلمرة المتسلسل).

المصلي كتابة HLAأجريت على مجموعات الخلايا المعزولة. يتم نقل مستضدات معقد التوافق النسيجي الرئيسي بشكل أساسي بواسطة الخلايا الليمفاوية. لذلك ، يتم استخدام تعليق الخلايا الليمفاوية التائية كناقلات رئيسية لمستضدات الصنف الأول ، وتعليق الخلايا الليمفاوية B لتحديد مستضدات الصنف الثاني من HLA. لعزل مجموعات الخلايا المطلوبة من الدم الكامل ، يتم استخدام إما الطرد المركزي أو الفصل المغناطيسي المناعي. يُعتقد أن الطريقة الأولى يمكن أن تؤدي إلى بيانات إيجابية خاطئة ، لأن هذا يؤدي إلى موت بعض الخلايا. يتم التعرف على الطريقة الثانية على أنها أكثر تحديدًا - تظل أكثر من 95 ٪ من الخلايا قابلة للحياة.

لكن أساس اختبار السمية اللمفاوية هو كتابة HLAهو مصل محدد يحتوي على أجسام مضادة لمختلف أنواع الأليلات من مستضدات الصنف الأول والثاني من HLA. يحدد الاختبار المصلي نوع HLA عن طريق فحص الأمصال التي تتفاعل مع الخلايا الليمفاوية والتي لا تتفاعل معها.

في حالة حدوث تفاعل بين الخلايا والمصل ، يتم تكوين مركب مستضد - جسم مضاد على سطح الخلية. بعد إضافة المحلول المحتوي على المكمل ، يحدث تحلل الخلايا والموت. تقييم اختبار كتابة HLA المصلي باستخدام الفحص المجهري الفلوري لتقييم ردود الفعل الإيجابية (التألق الأحمر) والسلبية (التألق الأخضر) ، أو الفحص المجهري الطوري عن طريق تلطيخ نوى الخلايا الميتة. يتم اشتقاق نتيجة تصنيف HLA مع الأخذ في الاعتبار خصوصية الأمصال المتفاعلة ومجموعات المستضدات المتفاعلة ، وشدة تفاعل السمية الخلوية.

مساوئ السيرولوجية كتابة HLAهي وجود تفاعلات متصالبة ، ضعف تقارب الجسم المضاد أو تعبير منخفض عن مستضدات HLA ، عدم وجود منتجات بروتينية في عدد من جينات HLA.

طرق جزيئية أكثر حداثة كتابة HLAيتم استخدام عينات تركيبية موحدة بالفعل لا تتفاعل مع المستضدات الموجودة على سطح الكريات البيض ، ولكن مع الحمض النووي وتشير مباشرة إلى المستضدات الموجودة في العينة. لا تتطلب الطرق الجزيئية كريات الدم البيضاء الحية ، ويمكن دراسة أي خلية بشرية ، وتكفي بضعة ميكرولترات من الدم للعمل ، أو يمكنك أن تقتصر على كشط الغشاء المخاطي للفم.

الجينات الجزيئية كتابة HLAيستخدم طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ، وتتمثل المرحلة الأولى منها في الحصول على الحمض النووي الجيني النقي (من الدم الكامل ، وتعليق الكريات البيض ، والأنسجة).

ثم يتم نسخ عينة الحمض النووي - تضخيمها في أنبوب اختبار باستخدام مواد أولية (DNA قصيرة أحادية الجديلة) خاصة بموضع HLA محدد. يجب أن تكون نهايات كل زوج من البادئات مكملة تمامًا لتسلسل فريد يتوافق مع أليل معين ، وإلا فلن يتم إجراء التضخيم.

بعد تفاعل البوليميراز المتسلسل ، في سياق النسخ المتعددة ، يتم الحصول على عدد كبير من شظايا الحمض النووي ، والتي يمكن تقييمها بصريًا. لهذا ، تخضع مخاليط التفاعل للتحليل الكهربائي أو التهجين ، ويتم تحديد ما إذا كان قد حدث تضخيم معين باستخدام برنامج أو جدول. يتم تقديم نتيجة كتابة HLA في شكل تقرير شامل على مستوى الجينات والأليلات. نظرا لتوحيد العينات المستخدمة الجزيئية كتابة HLAبمزيد من الدقة المصلية. بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يوفر مزيدًا من المعلومات (المزيد من أليلات DNA الجديدة) ومستوى أعلى من التفاصيل الخاصة به ، لأنه يسمح بتحديد ليس فقط المستضدات ، ولكن أيضًا الأليلات نفسها ، والتي تحدد أي مستضد موجود في الخلية.

تفاعل تحلل المناعة.يعتمد التفاعل على قدرة الأجسام المضادة المحددة على تكوين مجمعات مناعية مع الخلايا ، بما في ذلك كريات الدم الحمراء والبكتيريا ، مما يؤدي إلى تنشيط النظام التكميلي عن طريق المسار الكلاسيكي وتحلل الخلايا. من تفاعلات التحلل المناعي ، غالبًا ما يتم استخدام تفاعل انحلال الدم ، ونادرًا ما يكون رد فعل التحلل الجرثومي (بشكل رئيسي في تمايز الكوليرا والضمات الشبيهة بالكوليرا).

تفاعل انحلال الدم.تحت تأثير التفاعل مع الأجسام المضادة في وجود مكمل ، يتحول تعليق كريات الدم الحمراء إلى اللون الأحمر الفاتح السائل واضح- "ورنيش الدم" بسبب إفراز الهيموجلوبين. عند إجراء تفاعل ارتباط مكمل تشخيصي (CSC) ، يتم استخدام تفاعل انحلال الدم كمؤشر: لاختبار وجود أو عدم وجود (ارتباط) المكمل الحر.

تفاعل انحلال الدم الموضعي في مادة هلامية(تفاعل إرني) هو أحد متغيرات تفاعل انحلال الدم. يسمح لك بتحديد عدد الخلايا المنتجة للأجسام المضادة. يتم تحديد عدد الخلايا التي تفرز الأجسام المضادة - الهيموليزين ، من خلال عدد لويحات انحلال الدم التي تظهر في هلام أجار يحتوي على كريات الدم الحمراء ، وهو معلق خلوي للنسيج اللمفاوي قيد الدراسة والمكمل.

طريقة المناعي

(RIF ، تفاعل التألق المناعي) - طريقة للكشف عن Ar (Ab) محدد باستخدام Ab (Ar) مترافق مع الفلوروكروم. يمتلك حساسية وخصوصية عالية. يتم استخدامه للطب السريع للأمراض المعدية. الأمراض (تحديد العامل الممرض في الدراسة. المادة) ، وكذلك لتحديد مستقبلات AB والسطح وعلامات الكريات البيض (التنميط المناعي) والخلايا الأخرى. مباشرة I. م.يتكون في معالجة قسم الأنسجة أو اللطاخة من مادة مرضية أو قطع جرثومي باستخدام c-coy يحتوي على Ab محدد مترافق مع الفلوروكروم ؛ يتم غسل المستحضر لتحريره من Ab غير منضم ويتم مشاهدته تحت مجهر الفلورسنت. في الحالات الإيجابية ، يظهر مركب مناعي مضيء على طول محيط الجسم. التحكم مطلوب لاستبعاد مضان غير محدد. في بشكل غير مباشر. معهم.في المرحلة الأولى ، يتم معالجة قسم الأنسجة أو اللطاخة باستخدام c-coy غير الفلوري ، في المرحلة الثانية - c-coy المضيء ضد الجلوبيولين للحيوان الذي تم استخدامه في المرحلة الأولى. في الحالة الإيجابية ، يتم تكوين معقد مضيء ، يتكون من Ar و Ab له و Ab مقابل Ab (طريقة الساندويتش). بالإضافة إلى مجهر التلألؤ ، لمراعاة RIF عند التنميط الظاهري لخلايا التنميط ، استخدم فارز خلايا الليزر .

التدفق الخلوي- طريقة القياس البصري لمعلمات الخلية وعضياتها والعمليات التي تحدث فيها.

تتمثل التقنية في الكشف عن تشتت الضوء من شعاع الليزر عندما تمر خلية من خلاله في تيار من السائل ، ودرجة تشتت الضوء تسمح للفرد بالحصول على فكرة عن حجم الخلية وهيكلها. بالإضافة إلى ذلك ، يأخذ التحليل في الاعتبار مستوى تألق المركبات الكيميائية التي تشكل الخلية (التألق الذاتي) أو المضافة إلى العينة قبل قياس التدفق الخلوي.

تعليق الخلية ، المسمى سابقًا بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة الفلورية أو الأصباغ الفلورية ، يدخل تيار السائل عبر خلية التدفق. يتم تحديد الشروط بطريقة تصطف فيها الخلايا واحدة تلو الأخرى بسبب ما يسمى. التركيز الهيدروديناميكي للطائرة في الطائرة. في اللحظة التي تعبر فيها الخلية شعاع الليزر ، تسجل الكواشف:

تشتت الضوء بزوايا صغيرة (من 1 درجة إلى 10 درجات) (تستخدم هذه الخاصية لتحديد حجم الخلايا).

تشتت الضوء بزاوية 90 درجة (يسمح لك بالحكم على نسبة النواة / السيتوبلازم ، وكذلك عدم تجانس الخلايا وتفصيلها).

شدة التألق في عدة قنوات مضان (من 2 إلى 18-20) - تسمح لك بتحديد تركيبة السكان الفرعية لتعليق الخلية ، إلخ.